细胞简介：
人真皮微血管内皮分离自真皮组织；真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞（MEC）在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域，由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟，人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比，对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞，则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。
产品名称 | 人真皮微血管内皮细胞 | 组织来源 | 皮肤组织 |
英文名称 | Human Dermal Microvascular Endothelial Cells | 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 |
货号 | XG-X4640 | 生长特性 | 贴壁 |
产品信息:
产品名称 人真皮微血管内皮细胞
组织来源 皮肤组织
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 公司实验室分离的人真皮微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人真皮微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
人真皮微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养步骤：
1. 细胞复苏
运输与接收：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。
复苏操作：将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。
2. 细胞传代
传代时机：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤：
弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率：每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液：使用无血清冻存液。
冻存步骤：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-80℃，最终转入液氮长期保存。
公司正在出售的产品：
兔血管外膜成纤维细胞 Rabbit Vascular Adventitial Fibroblast Cells | AF680标记的活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗体 |
MEF小鼠胚胎成纤维细胞 | 质粒/蛋白制备样品内毒素凝胶法定量检测试剂盒 |
糖果柠檬酸比色法定量检测试剂盒 | 组织PKG-II激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） |
载玻片细胞CREB蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | CASPASE-10蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 |
基因靶标技术试剂盒 | Tafazzin蛋白抗体 |
植物葡萄糖6-磷酸异构酶（glucose-6-phosphate isomerase；GPI）电泳分析试剂盒 | INTS5蛋白抗体 |
肌球蛋白MYO1C抗体 | FAM124B蛋白抗体 |
干扰素调节因子2结合蛋白样蛋白抗体 | N-苄基十六烷酰胺74058-71-2 |
转录激活蛋白CRSP9抗体 | 睾酮58-22-0 |
通用转录因子ⅡA亚基2抗体 | 车轴草醇487-17-2 |
老年痴呆相关类钙粘蛋白CS1抗体 | 人真皮微血管内皮细胞山栀苷甲酯64421-28-9 |
细胞CASEIN KINASE 2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 小鼠肝外胆管上皮细胞 Mouse Extrahepatic Bile Duct Epithelial Cells |
蛋白样品多粘菌素层析法去内毒素试剂盒 | HuH-1细胞 |
产品注意事项：
无菌操作是生命线：所有操作必须在生物安全柜内严格无菌进行，使用专用试剂和耗材，防止交叉污染。
消化是关键步骤：
控制时间：使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化时，严格控制在1-2分钟内。显微镜下观察到细胞变圆、边缘松动即可终止，避免过度消化导致细胞损伤。
消化液选择：部分供应商推荐使用0.25%胰蛋白酶，也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的，可根据实验室条件和细胞反应选择。
培养基与生长因子：
基础培养基：推荐使用专用培养基（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基础培养基，需补充10-20%胎牛血清（FBS）及抗生素（如青霉素/链霉素）。
生长因子：为促进生长，可添加VEGF、FGF等内皮细胞生长因子。传代后可尝试对比培养（一瓶用原装完全培养基，一瓶用自配培养基）。
细胞密度与传代：
最佳传代密度：建议在细胞汇合度达70%-80%时进行传代，避免过度生长导致细胞状态下降。
生长不均处理：若细胞生长不均，成岛状分布，可将细胞消化后重新打散，加入新鲜培养基培养]^。
污染监测与处理：
定期检查：定期观察细胞有无支原体、细菌等污染迹象。
污染处理：若发现污染，需根据污染程度决定。轻度污染可尝试用含高浓度抗生素的培养液反复清洗，但严重污染时建议弃置细胞。
关键字： 人真皮微血管;内皮细胞;
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