技术原理
采用TaqMan探针法实时荧光RT-PCR技术，通过特异性引物和探针靶向RHDV2高度保守的VP60基因区域，实现病毒RNA的定性及定量检测。探针5'端标记FAM荧光报告基团，3'端标记BHQ1淬灭基团，通过荧光信号变化判定病毒核酸拷贝数。
产品名称 | 兔出血症病毒2 型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Rabbit Hemorrhagic Disease Virus Type 2 (RHDV2) Probe-based Fluorescent Quantitative RT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4839 |
产品特点
高灵敏度与特异性：引物及探针经优化设计，可检测低至10拷贝/μL的病毒RNA，且不与其它病毒RNA发生交叉反应。
双重功能：支持定性和定量检测，定量线性范围达5个数量级（10^1–10^6拷贝/μL）。
即用型设计：用户仅需提供样本核酸模板，试剂盒包含预混反应液、阳性对照（无传染性DNA片段）及标准曲线样品。
质控完善：提供阳性对照以排除假阴性结果，推荐重复检测临界值样本（CT值36–40）。
试剂盒组分
荧光RT-PCR预混反应液（含酶、dNTPs、缓冲液）
RHDV2特异性引物及探针混合液
阳性对照（1×10^7拷贝/μL DNA片段）
荧光RT-PCR专用模板稀释液
无核酸酶水
说明书
适用样本
组织样本：脾脏、扁桃体、肾脏、淋巴结等病变组织
体液样本：全血、分泌物
操作步骤
样本处理：按病毒RNA提取试剂盒说明书提取样本RNA，反转录合成cDNA。
标准曲线制备：将阳性对照10倍梯度稀释（10^6–10^1拷贝/μL），每管取5 μL加入45 μL稀释液，冰上保存。
PCR反应体系：
预混反应液：18 μL
引物探针混合液：2 μL
模板（cDNA或标准品）：2 μL
扩增程序：
95℃预变性3分钟
95℃ 10秒 → 59℃ 10秒 → 72℃ 25秒，共45循环（荧光信号采集于延伸阶段）
结果判读
阳性：CT值≤36且扩增曲线呈S型。
阴性：无CT值或CT≥40。
可疑：36<CT<40，需复检确认。
注意事项
标准品稀释需在独立区域操作，避免污染。
反复冻融≤5次，-20℃避光保存，有效期12个月。
本产品仅限科研使用。
适用仪器
兼容ABI、安捷伦MX3000P/3005P、Bio-Rad等荧光定量PCR仪。
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关键字： 兔出血症病毒2 型;染料法荧光定量;PCR试剂盒;