产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发，专用于人鼻病毒1A（Human Rhinovirus 1A）的定性与定量检测。适用于科研用途，具有高灵敏度和特异性，线性范围达5个数量级，可兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI、Bio-Rad等）。
产品名称 | 人鼻病毒1A探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Human Rhinovirus 1A (HRV1A) Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4840 |
试剂盒组成
人鼻病毒1A扩增液：25μL×1管
人鼻病毒1A反应液：975μL×1管
阳性质控品（1×10^8拷贝/μL）：50μL×1管
阴性质控品：50μL×1管
说明书：1份
注：不同批号组分不可混用，包装规格可满足50次20μL体系反应。
储存与运输
保存条件：-20℃±5℃，避光保存，避免反复冻融（≤7次）。
有效期：12个月。
运输要求：低温泡沫箱加冰密封运输，阳性对照需单独存放。
实验前准备
自备材料：
无核酸酶离心管、滤芯吸头（10/200/1000μL）、移液器、离心机等。
样本DNA提取试剂（推荐商品化试剂盒，如病毒基因组DNA提取试剂盒）。
样本要求：
适用样本：全血、血清、呼吸道分泌物、拭子、病毒培养物等。
保存：短期-20℃，长期-70℃（避免反复冻融），运输需2~8℃冰袋。
操作步骤
1. 标准曲线制备（定量分析）
标记6管（7至2号），依次梯度稀释阳性质控品（10^8~10^3拷贝/μL）。
每管加入5μL稀释液，震荡混匀后冰上保存。
2. 样本DNA提取
提取N+2份样本（含阴阳性对照），避免交叉污染。
3. PCR反应体系配制（20μL/管）
| 组分 | 体积 |
| 人鼻病毒1A反应液 | 19.5μL |
| 人鼻病毒1A扩增液 | 0.5μL |
| 模板DNA/对照品 | 5μL |
4. 扩增程序设置
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3min | 1 |
| 扩增 | 95℃ | 15sec | 40 |
| | 55℃ | 30sec | |
5. 结果分析
定量检测：以阳性对照log浓度为横轴、Ct值为纵轴绘制标准曲线，计算样本浓度。
定性检测：
阳性：Ct≤35且呈典型扩增曲线；
可疑：35<Ct≤40，需复测；
阴性：Ct≥40或无扩增。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、加样需在不同区域进行。
防污染：使用一次性耗材，实验后以10%次氯酸或75%酒精消毒台面。
质控要求：
阴性对照：无Ct值或Ct≥40；
阳性对照：Ct≤30且曲线指数增长。
局限性：基因突变或提取效率差异可能导致假阴性。
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