预期用途

用于检测瓜类细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae ssp. citrulli)的核酸,适用于科研领域。该病原体可导致葫芦科作物毁灭性病害,本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术,具有高灵敏度和特异性。
产品名称 | 瓜类细菌性果斑病菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Acidovorax citrulli Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4841 |

试剂盒组成

扩增液:25μL×1管
反应液:975μL×1管
阳性质控品(无传染性DNA片段):50μL×1管
阴性质控品:50μL×1管
说明书:1份
检验原理

针对病原体保守基因区域设计特异性引物及探针,通过实时荧光PCR扩增检测目标核酸。阳性样本在扩增过程中释放荧光信号,经仪器分析实现定性与定量检测。
操作步骤

样本处理:
使用商品化DNA提取试剂盒(推荐配套试剂)提取样本核酸,避免交叉污染。
短期保存于-20℃,长期保存需-70℃。
试剂配制:
反应体系(20μL/管):19.5μL反应液 + 0.5μL扩增液。
每批次需设置阴性对照(阴性质控品)和阳性对照(阳性质控品)。
PCR扩增:
仪器参数:
预变性:95℃ 10分钟
扩增循环(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 60秒(采集FAM通道信号)
结果判读
定性检测:
阴性对照Ct≥40,阳性对照Ct≤39且呈典型扩增曲线。
样本Ct≤39判为阳性,≥40为阴性;临界值(39-40)需复测。
定量检测:通过标准曲线(10^1-10^7拷贝/μL梯度稀释)计算样本浓度。
注意事项

防污染措施:
分区域操作(样本处理、试剂配制、扩增区)。
使用带滤芯吸头及专用耗材。
质量控制:
避免试剂反复冻融,配制后避光保存。
若阳性对照无信号或阴性对照出现扩增,实验无效。
局限性:
结果需结合临床症状及其他检测方法综合判断。
基因突变或提取效率差异可能导致假阴性。
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪(如ABI系列、Bio-Rad、LightCycler等)。
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关键字: 瓜类细菌性果斑病菌;染料法荧光定量;PCR试剂盒;