产品概述
本试剂盒采用探针法荧光定量RT-PCR技术，专用于检测甲型流感病毒H7N4亚型的RNA，适用于科研用途。试剂盒包含优化的引物、探针及对照体系，具备高灵敏度和特异性，可定性或定量分析样本，线性范围达5个数量级。
产品名称 | 甲型流感（禽流感）病毒H7N4亚型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Avian Influenza Virus H7N4 Subtype Probe-based Fluorescent Quantitative RT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4872 |
产品组成
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | 探针法qRT-PCR缓冲液 | 500 μL |
| 试剂二 | 探针法qRT-PCR酶混合液 | 50-100 μL |
| 试剂三 | 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL |
| 试剂四 | PCR引物-探针干粉/混合液 | 50-100 μL |
| 试剂五 | PCR阳性对照（10^7-10^8拷贝/μL） | 50 μL |
| 说明书 | 操作手册 | 1份 |
保存条件：-20℃避光保存，有效期12个月；运输需低温（2-8℃）。
操作流程
1. 标准曲线制备（以10^1-10^6拷贝/μL为例）
标记6管，依次加入45 μL稀释液，梯度稀释阳性对照（5 μL/管），涡旋混匀后冰上保存。
2. 样本RNA提取
建议设置阴性/阳性对照（N+2），使用兼容的RNA提取试剂纯化样本。
3. qRT-PCR反应（20 μL体系）
循环参数：
逆转录：50℃ 10 min
预变性：95℃ 10 min
PCR扩增（40循环）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM通道信号）
4. 数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴，Ct值为纵轴，计算样本浓度。
定性检测：Ct≤36为阳性，≥40为阴性；36-40需复测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需独立区域，避免交叉污染。
质量控制：
阴性对照Ct≥40，阳性对照Ct≤36且呈典型扩增曲线。
安全规范：
使用一次性耗材，实验后以10%次氯酸或75%乙醇消毒台面。
所有废弃物按生物危害物处理。
局限性
检测结果受样本采集、运输及保存条件影响；
病毒变异可能导致假阴性；
仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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关键字： 甲型流感（禽流感）病毒H7N4亚型;染料法荧光定量;PCR试剂盒;