预期用途
本试剂盒基于TaqMan探针法荧光定量PCR技术，用于检测管圆线虫（Angiostrongylus cantonensis）的核酸。管圆线虫是一种广泛分布于热带及亚热带地区的寄生虫，终末宿主为鼠类，中间宿主包括螺类、蜗牛等。本产品适用于科研领域，可快速、灵敏地检测临床或环境样本中的管圆线虫DNA，辅助感染诊断或流行病学研究。
产品名称 | 管圆线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Angiostrongylus cantonensis Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4889 |
检验原理
通过设计管圆线虫基因高度保守区域的特异性引物及探针，在PCR扩增过程中，探针与靶序列结合后释放荧光信号，利用荧光定量PCR仪实时监测信号强度，实现核酸的定性和定量分析。
试剂组成
| 名称 | 规格 |
| 管圆线虫扩增液 | 25μL×1管 |
| 管圆线虫反应液 | 975μL×1管 |
| 阳性质控品 | 50μL×1管（含靶序列） |
| 阴性质控品 | 50μL×1管（无靶序列） |
| 说明书 | 1份 |
注意事项：
不同批号试剂不可混用。
试剂盒组分可满足50次检测需求。
储存条件及有效期
-20℃±5℃避光保存，避免反复冻融（≤7次），有效期12个月。
适用仪器
兼容ABI系列、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad等荧光定量PCR仪。
自备耗材与设备
无核酸酶的离心管（1.5mL）、PCR反应管（0.2mL）、滤芯吸头（10/200/1000μL）。
离心机、振荡混匀器、移液器。
样本要求
样本类型：全血、血清、粪便、呼吸道分泌物、组织（如肠道、脾脏）等。
保存条件：短期-20℃保存，长期需-70℃以下，避免反复冻融。运输时使用2~8℃冰袋。
操作步骤
DNA提取
推荐使用商品化核酸提取试剂盒（如Hypure病毒基因组DNA提取试剂盒）。
试剂配制
解冻试剂后混匀离心，按N（样本数+阴阳性对照）配制反应体系：
管圆线虫反应液：19.5μL/管
管圆线虫扩增液：0.5μL/管
分装至PCR管，转移至样本处理区。
加样
每管加入5μL模板DNA或阴阳性质控品，离心混匀。
PCR扩增
设置反应程序：
预变性：95℃ 2分钟
循环：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（40循环）
选择FAM通道检测荧光信号。
结果判读
阳性：Ct值≤35，且扩增曲线呈S型。
阴性：无Ct值或Ct值＞38。
注意事项
实验需分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），避免污染。
首次使用前建议通过标准曲线验证灵敏度。
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