人腺病毒通用探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 人腺病毒通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Universal Human Adenovirus Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4685 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术，专为检测人腺病毒（Human Adenovirus, HAdV）设计，可覆盖A-G共7个亚属的通用型检测。人腺病毒为无包膜双链DNA病毒，直径90-100nm，目前已发现至少90个基因型，与多种人类疾病相关。本产品适用于科研用途，具备高灵敏度（100拷贝/反应）、高特异性（针对保守区设计引物探针）及广谱检测能力。
产品组成
| 成分 | 规格 | 包装说明 |
| 2×Probe qPCR MasterMix | 0.5 mL | 0.5 mL本色管 |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL | 1.5 mL绿盖管 |
| 超纯水 | 1 mL | 1.5 mL蓝盖管 |
| 引物-探针干粉 | 50次反应 | 0.5 mL棕色管（需复溶）|
| 阳性对照（1E7拷贝/μL） | 50 μL | 0.5 mL黄盖管 |
| 使用手册 | 1份 | 纸质文档 |
包装形式：五孔盒装，-20℃保存，有效期24个月。
技术参数
检测方法：实时荧光定量PCR（FAM通道，淬灭基团TAMRA）。
灵敏度：100拷贝/反应。
线性范围：定量检测时覆盖1E1-1E6拷贝/μL（5个数量级）。
反应体系：20 μL/次，可完成50次检测。
特异性：仅识别人腺病毒保守序列，无交叉反应。
操作步骤
标准曲线制备（6个梯度稀释）
标记6管（6-1号），每管加45 μL稀释液。
取5 μL阳性对照（1E7拷贝/μL）加入6号管，震荡混匀得1E6拷贝/μL，依次稀释至1号管（1E1拷贝/μL）。
所有稀释样品冰上暂存，避免污染。
样品DNA制备
设置N+2个提取（含阳性/阴性对照），推荐使用兼容的核酸提取试剂盒。
阳性对照：4号稀释液10 μL加水至所需体积；阴性对照：超纯水。
PCR反应（20 μL体系）
| 成分 | 样品管（N+2） | 阴性对照 | 标准曲线管（1-6） |
| 2×MasterMix | 10 μL | 10 μL | 各10 μL |
| 引物-探针混合液 | 3 μL | 3 μL | 各3 μL |
| 待测DNA/标准品/水 | 7 μL | 7 μL水 | 各7 μL对应标准品 |
PCR程序：
预变性：95℃ 10分钟；
40循环：95℃ 15秒 → 60℃ 60秒（采集荧光信号）。
数据分析
定量检测：以标准曲线log值为横轴、Ct值为纵轴，计算样品浓度。
定性检测：Ct值＜40为阳性，≥40或无Ct值为阴性。
注意事项
防污染：标准品稀释需在独立区域操作，使用带滤芯枪头。
质量控制：若阳性对照无信号或阴性对照出现扩增，实验无效需重做。
保存条件：引物-探针干粉复溶后-20℃保存，避免反复冻融。
适用范围与声明
用途限制：仅限科研，不可用于临床诊断。
自备试剂：样本DNA、核酸提取试剂等。
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