凝结芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 凝结芽孢杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Bacillus coagulans Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4822 |
产品概述
本试剂盒基于探针法荧光定量PCR技术开发，专用于检测凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）或其特定亚型（如BC01）的核酸，适用于科研领域的定性或定量分析。试剂盒具有高灵敏度和特异性，可有效避免与其他微生物DNA的交叉反应，并提供标准曲线构建所需的阳性对照。
产品特点
即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。
高灵敏度与特异性：引物及探针针对目标菌保守区域设计，检测限低至10拷贝/μL。
双重检测功能：支持定性和定量分析，定量线性范围达5个数量级（10^1–10^6 拷贝/μL）。
稳定性：含无传染性DNA片段作为阳性对照，避免活体样本污染风险。
兼容性：与主流DNA提取试剂盒兼容。
包装规格
试剂一：qPCR缓冲液，500 μL
试剂二：qPCR酶混合液，50 μL
试剂三：荧光PCR模板稀释液，1 mL
试剂四：PCR引物-探针干粉，50次反应
试剂五：阳性对照（10^7 拷贝/μL），50 μL
反应次数：50次（20 μL体系/次）
操作步骤
标准曲线制备
标记6管，分别加入45 μL稀释液。
梯度稀释阳性对照（10^7 拷贝/μL），依次获得10^6–10^1 拷贝/μL的标准品，冰上保存。
样本DNA制备
建议设置阴性对照（水）和阳性对照（稀释阳性模板）。
使用兼容的DNA提取方法纯化样本。
qPCR反应体系（20 μL）
程序设置：
逆转录（若需）：50℃ 10 min
预变性：95℃ 10 min
扩增（40循环）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM信号）
数据分析
定量检测：通过标准曲线计算样本拷贝数。
定性检测：Ct≤39为阳性，Ct≥40为阴性；临界值需复测。
注意事项
分区操作：样本处理、试剂配制、扩增需在不同区域进行，避免污染。
质量控制：每次实验需包含阴/阳性对照。
保存条件：
短期：-20℃；长期：-70℃（≤6个月）。
运输需使用2–8℃冰袋，禁止反复冻融。
安全规范：实验废弃物需按生物危害物处理，工作台用10%次氯酸或75%乙醇消毒。
局限性
检测结果受样本质量、提取效率及运输条件影响。
基因变异可能导致假阴性；交叉污染可能导致假阳性。
仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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