产品介绍:
口蹄疫病毒亚洲1型(FMDV-Asia1)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种专门用于检测口蹄疫病毒亚洲1型核酸的分子诊断工具。该试剂盒基于实时荧光定量RT-PCR技术,能够快速、灵敏地检测样本中的FMDV-Asia1 RNA,为口蹄疫的临床辅助诊断、流行病学调查及进出口检疫提供技术支持。
产品名称 | 口蹄疫病毒亚洲1型(FMDV-Asia1)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3681 |
1. 检测原理
该试剂盒主要采用一步法实时荧光定量RT-PCR技术(One-step qRT-PCR)。
靶标基因: 针对FMDV-Asia1基因组中的非结构蛋白(如3D)或结构蛋白(VP1)的保守序列设计特异性引物和探针。
检测方法: 常见的有两种技术路线:
TaqMan探针法: 使用FAM荧光标记的特异性探针。若样本中存在FMDV-Asia1 RNA,在逆转录和扩增过程中,探针被水解,释放荧光信号。
SYBR Green染料法: 利用SYBR Green I染料特异性结合双链DNA的特性。若扩增出特异性产物,染料结合并发出荧光。该方法通常需要后续进行熔解曲线分析以确认产物特异性。
内标/对照: 试剂盒通常包含阳性对照(人工合成的RNA片段或质粒)和阴性对照(无核酸水),用于监控反应体系的有效性。
2. 产品特点
高特异性: 引物和探针经过优化,能特异性识别FMDV-Asia1,通常不会与口蹄疫病毒的其他血清型(如O型、A型)或其他猪/牛常见病原体(如猪水泡病病毒)发生交叉反应。
高灵敏度: 灵敏度极高,最低检测限可低至 500 copies/μL(部分产品可达10² copies/mL),能够检测到极低浓度的病毒,显著高于病毒分离法。
快速高效: 整个检测过程(包括RNA提取和PCR扩增)通常在 2-3小时 内完成,有助于疫情的早期发现和快速处置。
操作简便: 市售试剂盒多为预混液形式,减少了配液步骤和污染风险。
3. 主要用途
临床辅助诊断: 用于检测疑似感染动物(猪、牛、羊等)的水泡皮/水泡液、咽喉拭子、组织样本(如淋巴结、脾脏)或血清,辅助确诊FMDV-Asia1感染。
流行病学调查: 用于疫区监测、病毒分离株的鉴定及病毒基因组变异分析。
进出口检疫: 用于进出口动物及动物产品的病原检测。
4. 储存与使用注意事项
储存条件: 试剂盒组分(特别是酶混合液)通常需要 -20℃ 避光保存,避免反复冻融(通常建议不超过3-5次),有效期通常为12个月。
样本类型: 主要用于检测水泡液/皮、组织匀浆液、拭子或血清。
操作规范: 需在具备PCR检测资质的实验室进行,严格分区操作(试剂准备区、样本制备区、扩增区),防止气溶胶污染。
结果判读(参考值):
阳性: FAM通道(或SG通道)扩增曲线呈典型“S”型,且Ct值 ≤ 35-40(不同厂家设定阈值不同)。
阴性: 无扩增曲线,或Ct值大于阈值。
无效: 阳性对照未扩增或阴性对照出现扩增,提示实验失败,需重做。
PCR试剂盒的核心类型:
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
公司正在出售的产品:
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关键字: 口蹄疫病毒亚洲1型; FMDV-Asia1 ; 荧光PCR法;核酸检测试剂盒;
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