产品介绍:
这是一种用于检测牛支原体(Mycoplasma bovis)的高灵敏度分子诊断试剂,广泛应用于规模化牛场的呼吸道疾病防控、奶牛乳腺炎检测及进出口检疫。
产品名称 | 牛支原体(MYPB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3714 |
1. 核心用途与背景 ��
针对疾病:牛支原体感染可引起牛的肺炎、乳腺炎、关节炎及角膜结膜炎,是畜牧业中危害严重的病原体之一。
检测靶标:试剂盒通常针对牛支原体基因组中的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针。常见的靶标基因包括16S rRNA基因或Urease基因(脲酶基因)。
适用样本:适用于鼻咽拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液、乳汁、病灶组织(如肺脏、关节液)及细胞培养物。
2. 检测原理与技术 ��
技术方法:实时荧光定量PCR法(TaqMan探针法)。
原理:利用特异性探针(通常标记FAM荧光素)与目标DNA序列结合。在PCR扩增过程中,Taq酶的5'→3'外切酶活性会切断探针,释放荧光信号。仪器实时监测荧光信号的累积,从而实现对牛支原体核酸的定性或定量检测。
内标质控:部分高端试剂盒包含内源性内标(如VIC/HEX通道),用于监测试剂盒有效性及样本提取过程是否受抑制。
3. 主要性能参数 ��
性能指标 参数详情 备注
检测限 10³ - 10⁴ 拷贝/mL 灵敏度高,可检测出低浓度感染
特异性 100% 不与牛源其他细菌(如巴氏杆菌、溶血曼氏杆菌)及支原体(如无胆甾原体)交叉反应
检测时间 约 60 - 90 分钟 含预变性、扩增过程
包装规格 25T / 48T / 50T T代表测试次数
储存条件 -20℃ 避光保存,避免反复冻融
有效期 12个月 具体以产品说明书为准
4. 结果判读标准 ��
阳性(+):
FAM荧光通道出现典型的S型扩增曲线。
Ct值 ≤ 35(部分厂家标准为38)。
结论:样本中检出牛支原体核酸。
阴性(-):
FAM通道无Ct值,或Ct值 > 38,且无指数增长期。
无效实验:
阳性对照未扩增(Ct值 > 35)。
阴性对照出现扩增曲线。
内标未扩增(提示样本存在抑制物或提取失败)。
温馨提示
样本采集:对于呼吸道疾病,鼻咽拭子或支气管肺泡灌洗液的检出率通常高于血液。
疫苗干扰:目前的灭活疫苗或弱毒疫苗通常不会导致荧光PCR检测出现强阳性(除非接种后立即采样),但需注意区分野毒感染与疫苗毒。
混合感染:牛支原体常与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)等混合感染,若条件允许,建议使用多重PCR试剂盒进行联合检测。
PCR试剂盒的核心类型:
1. 常规PCR试剂盒
原理:通过引物扩增目标DNA片段,产物经琼脂糖电泳检测。
特点:操作简单、成本低,适用于定性检测(如牛疱疹病毒1型PCR试剂盒)。
典型应用:动物病原体筛查。
2. 荧光定量PCR(qPCR)试剂盒
探针法(TaqMan):
利用特异性探针结合目标序列,荧光信号实时监测扩增过程。
优势:高特异性(如牛白血病病毒试剂盒)、宽线性范围(10²–10⁷拷贝/μL)。
染料法(SYBR Green):
染料嵌入双链DNA发光,成本较低,但需优化引物特异性。
3. 恒温扩增试剂盒
技术:LAMP、RPA等,无需热循环仪,适合现场检测。
公司正在出售的产品:
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富含亮氨酸胶质瘤失活蛋白1抗体 | 染色体相关蛋白2抗体 |
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关键字: 牛支原体;MYPB ;核酸检测试剂盒;荧光PCR法;
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