产品介绍:

核心技术参数与性能
检测原理:
普通PCR法: 通过特异性引物扩增FHV的保守基因片段(如预期产物长度约200bp),扩增产物需通过琼脂糖凝胶电泳进行鉴定。
荧光定量PCR法(探针法/染料法): 利用TaqMan探针或SYBR Green染料,在PCR扩增过程中实时监测荧光信号,实现定量检测。
产品名称 | 猫疱疹病毒(FHV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) | 货号 | AP3720 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
检测范围与灵敏度:

荧光定量法: 灵敏度极高,部分产品可达到 500 copies/mL 甚至 10 copies/μL 的检测限,线性范围通常覆盖5个数量级。
普通PCR法: 灵敏度相对较低,但足以满足常规定性检测需求。
特异性:
引物和探针通常针对FHV-1的gB基因或DNA聚合酶基因的保守区设计,与猫杯状病毒(FCV)、猫泛白细胞减少症病毒(FPV)等其他猫呼吸道病原体无交叉反应。
3. 标准操作流程 (SOP) 关键点

样本类型:
适用标本: 猫的眼分泌物、鼻分泌物、咽拭子或组织研磨液。
核酸提取:
需自备病毒DNA提取试剂盒。FHV为双链DNA病毒,提取后可直接作为模板。
试剂配制与加样:
对照设置: 必须设置阴性对照(无菌水或阴性质控品)和阳性对照(试剂盒提供)。
反应体系: 通常为20μL(染料法)或25μL(探针法)体系。
PCR扩增:
普通PCR程序(参考):
预变性:95℃ 5min
循环(35个):95℃ 15sec -> 57℃ 15sec -> 72℃ 40sec
延伸:72℃ 10min
荧光定量PCR程序(参考):
预变性:95℃ 10min
循环(40-45个):95℃ 15sec -> 60℃ 30-40sec(收集荧光)。
结果判定:
普通PCR: 电泳条带大小与阳性对照一致(约200bp)判为阳性。
荧光定量PCR: Ct值 ≤ 35-40 且扩增曲线呈“S”型判为阳性。
4. 采购与使用注意事项

储存条件: 大多数试剂盒需在 -20℃ 条件下避光保存,避免反复冻融。
有效期: 通常为 12个月。
普通PCR试剂盒: 需普通PCR仪 + 电泳系统。
荧光定量PCR试剂盒: 需荧光定量PCR仪(如ABI 7500, Bio-Rad CFX96等)。
仅限科研/检测: 绝大多数此类产品标注为“仅用于科研实验”或“兽医体外诊断”,严禁用于临床医疗或人用。
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通用操作流程与注意事项:

1. 样本制备
使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA,需设置阳性、阴性对照。
关键点:避免交叉污染,阳性对照单独存放。
2. 反应体系配置
常规PCR:引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR:需额外加入探针或染料。
3. 扩增程序
常规PCR:
预变性→循环扩增→延伸
qPCR:
预变性→循环扩增(荧光采集)
4. 结果判读
常规PCR:电泳观察条带大小(如阳性对照需出现预期条带)。
qPCR:Ct值≤35为阳性,阴性对照无信号。
关键字: 猫疱疹病毒;FHV ;核酸检测试剂盒;荧光PCR法;
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