牛结节性皮肤病（LSDV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法） 新品

产品介绍：

核心技术参数与性能

检测原理：

基于TaqMan探针法或SYBR Green染料法的实时荧光定量PCR技术。

靶标基因通常选择LSDV高度保守的基因片段（如ORF011、ORF012或P32基因）。

检测范围与灵敏度：

检测范围： 通常为 2×10³ ~ 1×10⁸ copies/mL。

最低检测限： 大多数试剂盒可达 1×10³ copies/mL，部分产品灵敏度更高。

特异性：

专一性检测牛结节性皮肤病病毒，不与山羊痘病毒（GTPV）、绵羊痘病毒（SPPV）或其他牛呼吸道病原体发生交叉反应。

部分高级试剂盒采用多重荧光PCR技术，可同时区分LSDV、GTPV和SPPV。

内参系统：

部分试剂盒包含内源性对照（如牛β-actin基因）或外源性对照（如MS2噬菌体），用于监控样本提取及PCR抑制物干扰。

3. 标准操作流程 (SOP) 关键点

样本类型：

适用标本： 病牛的皮肤结节或结痂周围组织、全血（EDTA抗凝）、血清、唾液、鼻腔拭子或乳汁。

核酸提取：

需自备病毒DNA提取试剂盒。LSDV为DNA病毒，提取后可直接作为模板。

试剂配制与加样：

对照设置： 必须设置阴性对照（无菌水）和阳性对照（试剂盒提供，通常为质粒或灭活病毒）。

反应体系： 通常为20μL或25μL体系。

荧光PCR扩增：

荧光通道： 选择 FAM 通道（或根据试剂盒说明书指定的染料）。

程序设置（参考）

预变性：95℃ 3-5min

循环反应（40-45个循环）：95℃ 10-15sec -> 55℃-60℃ 30-40sec（收集荧光）。

结果判定：

阳性： Ct值 ≤ 35-40，且扩增曲线呈典型的“S”型指数增长。

阴性： Ct值 ≥ 40，且无典型扩增曲线。

采购与使用注意事项

储存条件： 大多数试剂盒需在 -20℃ 条件下保存，避免反复冻融。

有效期： 一般为 12个月。

仅限科研/检测： 绝大多数此类产品标注为“仅用于科研实验”或“兽医体外诊断”，严禁用于临床医疗或人用。

生物安全： 操作病料样本时需在生物安全二级（BSL-2）实验室进行，做好个人防护。

公司正在出售的产品：

通用操作流程与注意事项：

1. 样本制备

使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。

关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。

2. 反应体系配置

常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需额外加入探针或染料。

3. 扩增程序

常规PCR：

预变性→循环扩增→延伸

qPCR：

预变性→循环扩增（荧光采集）

4. 结果判读

常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。

qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。