产品介绍：
这类试剂盒专门用于区分野生型病毒（野毒株）与疫苗株，是评估免疫效果、监测野毒入侵及净化疫病的重要工具。
产品名称 | 小反刍兽疫病毒野毒株(PPRV-W)核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3750 |
1. 核心用途与背景 ��
针对疾病：小反刍兽疫（Peste des Petits Ruminants, PPR），俗称“羊瘟”，是由副黏病毒科病毒引起的山羊、绵羊等小反刍动物的高度接触性传染病，致死率高。
鉴别意义：市面上常用的疫苗多为Nigeria 75/1株等弱毒疫苗。普通PCR试剂盒无法区分是接种疫苗产生的抗体还是野毒感染。
野毒株检测试剂盒（PPRV-W）：专门针对野毒株特有的基因序列（如F基因、N基因特定区段或L基因特定突变位点）设计引物探针，不与疫苗株发生交叉反应。
适用样本：适用于发病动物的全血、血清、组织脏器（脾脏、淋巴结、肠道）及拭子样本。
2. 检测原理与技术 ��
技术方法：实时荧光定量PCR法（TaqMan探针法）。
原理：利用野毒株基因组中高度保守且区别于疫苗株的特异性序列设计引物和探针（通常标记FAM荧光素）。只有当样本中存在野毒株核酸时，PCR扩增才会启动并释放荧光信号。
双重检测：部分高端试剂盒采用双重荧光PCR技术，一个反应管中同时检测野毒株（如FAM通道）和疫苗株（如VIC/HEX通道），甚至包含内标（ROX通道），一步完成鉴别。
3. 主要性能参数 ��
性能指标 参数详情 备注
检测限 1×10³ 拷贝/mL 灵敏度高，可检出早期感染
特异性 100% 仅特异性识别野毒株，不与疫苗株（如Nigeria 75/1）交叉反应
检测时间 约 60 - 90 分钟 含预变性、扩增过程
包装规格 25T / 50T T代表测试次数
储存条件 -20℃ 避光保存，避免反复冻融
有效期 12个月 具体以产品说明书为准
5. 结果判读标准 ��
野毒株阳性（+）：
野毒株检测通道（如FAM）出现典型的S型扩增曲线。
Ct值 ≤ 35（部分厂家标准为38）。
结论：样本中检出小反刍兽疫病毒野毒株核酸（提示野毒感染）。
野毒株阴性（-）：
野毒株通道无Ct值，或Ct值 > 。
注：若通用型（PPR-U）检测为阳性，但野毒株（PPR-W）检测为阴性，通常提示为疫苗株感染（即免疫成功）。
无效实验：
阳性对照未扩增（Ct值 > 35）。
阴性对照出现扩增曲线。
温馨提示
生物安全：小反刍兽疫属于OIE（世界动物卫生组织）必须报告的疫病，也是我国一类动物疫病。操作疑似阳性样本需在BSL-2级实验室进行。
疫苗干扰：该试剂盒设计初衷即是为了排除疫苗干扰。如果在免疫后检测出野毒株阳性（Ct值较低），说明可能存在野毒感染或病毒重组，需立即隔离并上报。
采样时机：在发热期、发病初期采样，检出率最高。组织样本中，脾脏和淋巴结的病毒载量通常最高。
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通用操作流程与注意事项：
1. 样本制备
使用核酸提取试剂盒纯化DNA/RNA，需设置阳性、阴性对照。
关键点：避免交叉污染，阳性对照单独存放。
2. 反应体系配置
常规PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR：需额外加入探针或染料。
3. 扩增程序
常规PCR：
预变性→循环扩增→延伸
qPCR：
预变性→循环扩增（荧光采集）
4. 结果判读
常规PCR：电泳观察条带大小（如阳性对照需出现预期条带）。
qPCR：Ct值≤35为阳性，阴性对照无信号。
关键字： 小反刍兽疫病毒野毒株;PPRV-W;核酸检测试剂盒;荧光PCR;
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