操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

Recombinant Human Fibronectin(重组人纤维连接蛋白)是一种高纯度的重组细胞外基质蛋白(通常由CHO细胞或大肠杆菌表达),作为多功能的细胞粘附分子,它能显著促进细胞贴壁、增殖及病毒转染效率,在干细胞培养、基因治疗和组织工程研究中具有核心应用价值。
产品名 | Recombinant Human Fibronectin | 分子量 | 44.83 KDa |
表达区间 | 1008-1231 | 货号 | XG-DB1984 |
别名
CIG, Cold insoluble globulin, Cold-insoluble globulin, DKFZp686F10164, DKFZp686H0342, DKFZp686I1370, DKFZp686O13149, ED B, Fibronectin 1, FINC, FINC_HUMAN, FN, FN1, FNZ, GFND, GFND2, LETS, Migration stimulating factor, MSF, Ugl-Y3
宿主; E.Coli
表达区间; 1008-1231
分子量; 44.83 KDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

甘油磷酸二酯酶磷酸结构域3抗体 | Percp-Cy5.5标记小鼠CD206单克隆抗体 |
脂肪组织特异性低分子量蛋白抗体 | 细菌抗生素(庆大)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒 |
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SBK2抗体 | 活体细胞半胱-5(CASPASE-5)活性原位荧光染色检测试剂盒 |
ELP4蛋白抗体 | 载玻片细胞TSH-BETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
石蜡切片苏木素染色试剂盒 | P21蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 |
通用型HSV1(HERPES SIMPLX1)病毒定性检测试剂盒 | ?10毫升玻璃匀浆器 |
组织FGR激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 磷酸化原癌蛋白CBL2抗体 |
肉类D-乳酸比色法定量检测试剂盒 | 蛋白激酶LYK5抗体 |
组织NLK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 嗅觉受体52E6抗体 |
过氧化物检测试剂专题 | 2'-5'-寡腺苷酸合成酶3抗体 |
腺苷酸活化蛋白激酶γ1单克隆抗体 | 类胰蛋白酶δ1抗体 |
纯化线粒体蛋白氧化(羰基化;carbonyl)比色法测定试剂盒 | Recombinant Human FibronectinWDR23蛋白抗体 |
环指蛋白128抗体 | G氨基丁酸A型受体θ/GABAA Rθ抗体 |
重组蛋白生产流程:

通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: Fibronectin;44.83 KDa; 1008-1231;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。