操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

Recombinant Human TWEAKR(重组人TWEAK受体),即TNFRSF12A/Fn14,是一种科研级重组蛋白,通常包含人源TWEAKR的胞外域(如Glu28-Pro80),主要用于研究其在细胞凋亡、炎症反应及肿瘤进展中的信号传导机制。
产品名称; Recombinant Human TWEAKR
别名; CD 266, CD266, CD266 antigen, FGF inducible 14, FGF-inducible 14, Fibroblast growth factor inducible immediate early response protein 14, Fibroblast growth factor-inducible immediate-early response protein 14, FN 14, FN14, TNFRSF 12A, TNFRSF12A, TNR12_HUMAN, Tumor necrosis factor receptor superfamily member 12A, TWEAK R, Tweak receptor, Tweak-receptor, TweakR
宿主; E.Coli
表达区间; 28-80
分子量; 5.7 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

富含半胱氨酸C端蛋白1抗体 | p153蛋白抗体 |
酯酶抑制蛋白C1IN抗体 | 辣根过氧化物酶标记的前列腺素E受体蛋白4抗体 |
维甲酸相关孤儿受体γt抗体 | 果蝇细胞冻存试剂盒 |
颗粒酶K抗体 | 通用型基因甲基化检测试剂盒 |
组织磷酸二酯酶2(PDE2)活性荧光定量检测试剂盒 | 细胞IGF 蛋白表达比色法定量检测试剂盒 |
血液尿激酶(UROKINASE)活性荧光定量检测试剂盒 | 组织血红素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性比色法定量检测试剂盒 |
细胞脂质过氧化氢(H2O2)活性比色法定量检测试剂盒 | X连锁Charcot-Marie-Tooth神经病变相关蛋白抗体 |
饮料环(cyclamate)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 | G蛋白激活内向钾通道3抗体 |
转基因水稻LibertyLink62品系基因检测试剂盒 | EIF2B2蛋白抗体 |
通用型蛋白免疫共沉淀(蛋白A树脂)试剂盒 | 脑特异性POU结构域同源盒基因3C抗体 |
动物细胞/组织甘露糖6-磷酸异构酶(mannose-6-phosphate isomerase;MPI)电泳分析试剂盒 | 动力结合蛋白DNMBP抗体 |
冰冻切片组织P27蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | Recombinant Human TWEAKR异戊酰辅酶A脱氢酶抗体 |
钾离子通道KIR2.3抗体 | 2号染色体开放阅读框84抗体 |
重组蛋白生产流程:

通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: TWEAKR;5.7 kDa; 28-80;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。