操作要点：
电泳条件：使用15% SDS-PAGE凝胶，以提高对小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
转膜参数：采用湿转法，100 V、60–90分钟（4°C），使用PVDF膜（需甲醇预活化）。
抗体选择：
一抗：抗CST3多克隆抗体（如兔源抗体），推荐稀释比为1:1000。
二抗：HRP标记的山羊抗兔IgG，稀释比1:10,000。
显色方式：ECL化学发光法，预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议：由于CST3分子量较小，可选用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作为内参，避免条带重叠。
产品概述：
Recombinant Human ACAT1是一种在大肠杆菌中表达、带有His标签的重组人源蛋白，作为关键的脂类代谢酶，用于催化乙酰辅酶A的乙酰转移反应及胆固醇酯化，广泛应用于酶活性研究与代谢机制探索。
产品名称; Recombinant Human ACAT1
别名; ACAT, ACAT 1, acat1, Acetoacetyl CoA thiolase, acetoacetyl Coenzyme A thiolase, Acetoacetyl-CoA thiolase, Acetyl CoA acetyltransferase, mitochondrial, Acetyl Coenzyme A acetyltransferase 1, Acetyl-CoA acetyltransferase, acetyl-coa acetyltransferase precursor, mitochondrial, Acetyl-CoA thiolase, mitochondrial, acetyl-Coenzyme A acetyltransferase 1, MAT, mitochondrial
宿主; E.Coli
表达区间; 34-187
分子量; 36.5 KDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明：
复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液（pH 7.4）溶解冻干粉，轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测，作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释，避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜，遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理：
基因克隆：从牛基因组中获取CST3基因的编码序列（对应氨基酸31–148），插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达：将重组质粒转化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高，适合大规模生产。
蛋白纯化：利用His标签与镍柱亲和层析结合，实现高纯度（>95%）蛋白回收，再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存：加入海藻糖作为保护剂，冻干后可长期稳定储存，复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品：
广泛控制氨基酸合成1样蛋白1抗体 | PDZ和LIM结构域结合蛋白5抗体 |
肿瘤坏死因子α转换酶抗体 | 生长分化因子15/巨嗜细胞抑制因子1单克隆抗体 |
酸敏感性钾离子通道蛋白抗体 | 细胞HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病毒定性检测试剂盒 |
跨膜蛋白TMED4抗体 | 通用型基因甲基化程度定量分析试剂盒 |
组织LYNA激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 活力和顶体形态双重荧光染色试剂盒 |
细胞PAK2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 血液二胺氧化酶（DAO）活性比色法定量检测试剂盒 |
50017 | TRIM30蛋白抗体 |
植物细胞可溶性总核蛋白粗提制备试剂盒 | G蛋白偶联受体6抗体 |
维生素B3比色法定量检测试剂盒 | E3泛素蛋白连接酶抗体DTX1抗体 |
真菌/酵母细胞蛋白核酸结合凝胶迁移电泳分析试剂盒 | 菱形结合域同源蛋白RHBDF1抗体 |
细菌耐酸（ACID-FAST）染色试剂盒 | 胆固醇25羟化酶抗体 |
冰冻切片组织CASPASE-5蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | Recombinant Human ACAT1烟碱型乙酰胆碱受体δ/AChRδ抗体 |
肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子抗体 | ADP核糖基化因子6抗体 |
重组蛋白生产流程：
通常包括以下几个核心步骤：
基因克隆：首先，科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列（目的基因）。
构建载体：将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中，这个载体就像是一个运输工具，
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主：将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中，这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养：宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养，其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息，开始大量生产目标蛋白。
纯化：通过一系列复杂的生物化学方法（如层析技术），将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来，以获得高纯度的产品。
关键字： ACAT1;36.5 KDa; 34-187;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
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