操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

Recombinant Human ACTN3(重组人辅肌动蛋白α3)是体外表达系统中合成的具有生物活性的人源蛋白,作为骨骼肌Z线的关键结构蛋白,它能交联F-肌动蛋白并调节肌肉收缩,常用于运动生理学、肌肉疾病机制及细胞骨架研究。
产品名称; Recombinant Human ACTN3
别名; Actinin alpha 3, actinin, alpha, ACTN 3, ACTN3, ACTN3_HUMAN, Alpha actinin skeletal muscle, Alpha actinin skeletal muscle isoform 3, Alpha-Actinin 3, Alpha-actinin skeletal muscle isoform 3, Alpha-actinin-3, F actin cross linking protein, F-actin cross-linking protein, MGC117002, MGC117005, OTTHUMP00000219049, OTTHUMP00000219054
宿主; E.Coli
表达区间; 325-608
分子量; 31.1 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

钙粘蛋白相关神经受体8抗体 | PE-Cy7标记人CD56 (NCAM)单克隆抗体 |
组蛋白H3.1抗体 | 细胞角蛋白15重组兔单克隆抗体 |
髓鞘相关糖蛋白a/b抗体 | 通用型HPV6(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR |
跨膜受体蛋白Notch-2抗体 | 组蛋白H3-K56乙酰化检测试剂盒 |
细胞IGF-1R激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 石蜡切片组织RHO 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
组织PAK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 细胞二胺氧化酶(DAO)活性比色法定量检测试剂盒 |
酵母DNA损伤彗星完全荧光检测试剂盒 | Tudor结构域蛋白TDRD3抗体 |
Arf1鸟苷酸酶活性分析试剂盒 | G蛋白偶联受体GPR113蛋白抗体 |
尿素待测样品处理试剂盒 | DNAJC12蛋白抗体 |
同位素标记放射活性TCA检测试剂盒 | 磷酸化整合素β3/CD61抗体 |
肠出血性大肠埃希菌(Enterohaemorrhagic E. coli)鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 | 蛋白酶体组装分子伴侣1抗体 |
CASPASE-4蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 | Recombinant Human ACTN3嗅球蛋白1抗体 |
环指蛋白122抗体 | 2号染色体开放阅读框69抗体 |
重组蛋白生产流程:

通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: ACTN3;31.1 kDa; 325-608;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。