产品介绍:

转基因大豆MON87705品系核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种用于检测样品中是否含有MON87705品系转基因大豆成分的分子生物学工具。该试剂盒基于实时荧光定量PCR(qPCR)技术,通过特异性扩增MON87705品系的旁侧序列或整合位点序列,实现对该特定转基因品系的精准鉴定和定量分析。
该试剂盒的核心原理是实时荧光定量PCR(qPCR),通常采用TaqMan探针法。
特异性靶标:以MON87705转基因大豆品系的特异性旁侧序列(即外源基因插入位点两端的序列)作为检测靶点。该序列是MON87705品系独有的“指纹”,确保检测结果的唯一性和准确性。
PCR扩增:在PCR反应体系中,如果样本模板中含有MON87705大豆DNA,特异性引物和探针便会结合并启动扩增。
产品名称 | 转基因大豆MON87705品系核酸检测试剂盒(荧光PCR法) |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3930 |
荧光信号累积:随着DNA的指数级扩增,荧光探针被切断,释放出荧光信号。仪器实时监测荧光信号的变化,从而判断样本中是否含有MON87705品系转基因大豆。
该试剂盒具有以下核心特点:

高特异性:能够特异性地检测MON87705品系,与其他非转基因大豆品种及其它转基因作物无交叉反应。
高灵敏度:检测灵敏度极高,能够检测到极低含量的MON87705成分,最低检出限可达 0.1% (w/w) 或 100拷贝/反应。
精准检测:针对品系特异性序列设计,可实现对特定转基因品系的“身份识别”,区别于常规的基因元件(如35S启动子、NOS终止子)检测。
快速高效:整个检测流程(从DNA提取到结果判读)通常在几小时内完成。
规格与成分

市面上的试剂盒规格通常为 48次/盒 或 50次/盒 (48T/50T)。
一个完整的试剂盒通常包含以下组分:
qPCR预混液 (Master Mix):包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、反应缓冲液及UNG酶(防污染)等。
特异性引物/探针混合物:针对MON87705品系旁侧序列设计。
阴性对照(或超纯水):用于作为空白对照,监测是否存在污染。
阳性对照:含有MON87705品系特异性DNA的标准品,用于验证试剂盒的有效性。
阴性对照(或超纯水):用于作为空白对照,监测是否存在污染。
内标 (部分型号):用于监控DNA提取和PCR扩增过程是否正常,防止假阴性。
使用方法

使用该试剂盒的标准流程如下:
样本采集与处理:
采集待测样品(如大豆种子、豆粉、饲料、食品等)。
对样品进行均质化处理(如研磨成粉),以利于后续的DNA提取。
DNA提取:
使用商业化的植物基因组DNA提取试剂盒,从处理后的样本中提取总DNA。
试剂准备与加样:
将试剂盒各组分从-20℃冰箱中取出,冰上融化并轻柔混匀。
按照说明书推荐的体系(如20μL),在PCR反应管中依次加入预混液、引物探针混合物、DNA模板(或对照品)。
上机扩增:
将配制好的PCR反应管放入荧光定量PCR仪中。
设置反应程序,典型的程序包括:预变性(如95℃ 10分钟),然后进行40-45个循环的变性(如95℃ 15秒)、退火/延伸(如60℃ 30-60秒)。
数据分析:
阳性判断:若样本的扩增曲线呈典型的“S”型,且Ct值小于设定的阈值(如Ct ≤ 35),则判为含有MON87705品系转基因大豆成分。
阴性判断:若样本无扩增曲线,或Ct值大于阈值(如Ct ≥ 40),则判为未检出MON87705品系成分。
质控要求:阳性对照必须出现“S”型扩增曲线且Ct值符合要求,阴性对照应无扩增曲线。
注意事项

保存条件:试剂盒需在 -20℃避光 条件下保存,有效期通常为12个月。避免反复冻融。
适用范围:该产品仅供科研或工业检测使用,不可用于临床诊断。
防止交叉污染:PCR实验极易受到外源DNA的污染。操作时需全程佩戴手套,使用带滤芯的枪头,并在独立的区域进行试剂配制、样本处理和PCR扩增。
结果解读:阴性结果不能完全排除MON87705成分的存在,可能由于DNA提取失败、样本中抑制物干扰或MON87705成分含量低于检测限导致。建议结合内标结果进行综合判断。
方法优势

相较于传统的细菌培养法(耗时长、生物安全要求极高)或血清学检测(窗口期长),荧光PCR法具有显著优势:
高特异性: 通过针对鼠疫杆菌特异性基因(如caf1、pla)设计的引物和探针,能够精准识别目标菌,有效区分近缘菌种(如假结核耶尔森氏菌),避免假阳性。
高灵敏度: 检测灵敏度极高(部分产品最低检测限可达1-10 CFU/mL或10-100拷贝/毫升),有助于在感染早期、菌血症含量较低或样本经过抗生素治疗后做出准确判断。
快速高效: 从样本DNA提取到出结果通常在数小时内完成,远快于传统培养法(通常需要数天),适合在突发公共卫生事件中对大量样本进行快速筛查。
安全便捷: 采用闭管检测模式,扩增后无需开盖处理,大大降低了扩增产物污染和操作人员接触高致病性病原体的风险。部分试剂盒采用预混冻干技术,便于试剂的储存和运输。
公司正在出售的产品:

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锌指蛋白蛋白474抗体 | DPY19L2蛋白抗体 |
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人Traf2结合蛋白(T2BP)核酸检测试剂盒 | 植物膜蛋白提取试剂盒100T |
质量控制与常见问题:

污染防控:
分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增区),使用带滤芯吸头。
实验后用10%次氯酸或紫外灯清洁工作台。
假阴性处理:
检查样本抑制物(如使用内标基因)。
试剂保存:
-20℃避光保存,避免反复冻融。
关键字: 转基因大豆MON87705品系;MON87705;核酸检测试剂盒;荧光PCR法;
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