产品介绍:
莫氏立克次体核酸检测试剂盒(荧光PCR法)是一种针对地方性斑疹伤寒(鼠型斑疹伤寒)病原体的高特异性分子诊断工具,通过实时荧光定量PCR技术实现对莫氏立克次体核酸的精准检测,主要用于科研实验中的病原体筛查和辅助诊断,其检测结果需结合临床症状和流行病学史进行综合判断。
产品名称 | 莫氏立克次体核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法) | 货号 | AP4060 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
一、核心作用与检测原理
该试剂盒主要用于检测全血等临床样本中莫氏立克次体的核酸,其核心原理基于莫氏立克次体的特异性基因片段:
靶标选择:针对莫氏立克次体的特异性基因片段设计引物和探针。具体的靶标基因在所给资料中未明确指出,但同类试剂盒常以ompA、gltA等保守基因为靶标。
检测方法:采用TaqMan探针法,利用特异性引物和荧光标记的探针,在PCR扩增过程中实时监测荧光信号,实现对莫氏立克次体的特异性检测。
特异性验证:引物经过精心优化,专一性强,只扩增莫氏立克次体,与其他病原体无交叉反应。
二、产品性能与规格参数
性能指标 参数说明
检测方法 实时荧光PCR法(探针法)
规格 48-50T/盒(不同品牌有差异)
保存条件 -20℃以下保存,避免反复冻融
有效期 6个月至1年(不同品牌有差异)
适用仪器 ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列等主流荧光定量PCR仪
灵敏度 检测限可达几百拷贝/反应(具体数值因试剂盒而异)
特异性 与非目标物种无交叉反应
核心操作步骤
三、操作流程与质量控制
核心操作步骤
样本处理:用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管,取下层血细胞50μL加入100μL双蒸水吹匀
DNA提取:加入等体积核酸提取液,100℃处理10min,13000rpm离心5min,取上清液-20℃保存
试剂配制:将荧光PCR反应液(qPCR MIX)冰上融化混匀,按15μL/管分装
加样:向每管中加入处理后样品/阴性对照/阳性对照5μL
扩增反应:运行荧光定量PCR程序(不同试剂盒的程序可能存在差异。例如,一个试剂盒推荐的程序为:50℃ 2分钟;95℃ 10分钟;然后进行40个循环的扩增,每个循环包含95℃ 15秒和60℃ 30-40秒。而另一个试剂盒则推荐:95℃ 5分钟;然后进行30个循环的扩增,每个循环包含95℃ 15秒、57℃ 15秒、72℃ 40秒;最后在72℃延伸10分钟。具体反应条件应以所使用试剂盒的说明书为准。)57
质量控制要点
阴阳性对照:必须设置阴性对照(应无扩增或Ct值≥40)和阳性对照(应有典型扩增曲线且Ct值≤35)
严格分区操作:分为试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区,避免交叉污染
防污染措施:使用带滤芯吸头,实验后用10%次氯酸或75%酒精处理工作台
标准曲线:部分试剂盒需制备标准曲线进行定量分析
四、应用场景与局限性
主要应用场景
科研研究:莫氏立克次体分子生物学特性研究
疾病监测:在地方性斑疹伤寒自然疫源地进行监测
疫情调查:在疑似疫情暴发时进行病原体确认
检测方法局限性
仅限科研:根据产品说明,该试剂盒仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗
无法区分活菌:PCR检测不能区分活菌与死菌,阳性结果需结合临床症状综合判断
样本质量依赖:样本采集、运输和保存不当会导致DNA降解,影响检测结果
公司正在出售的产品:
CD134抗体 | SNAP-beta 可溶性附着蛋白β-SNAP抗体 |
单羧酸转运蛋白13抗体 | 磷酸化蛋白磷酸酶2A(PP2Aα)抗体 |
MT CTR1抗体 | WDR23 WDR23蛋白抗体 |
富含亮氨酸重复蛋白8B抗体 | 大鼠CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)核酸检测试剂盒 |
human CD25/FITC FITC标记人CD25单克隆抗体 | 人肝素结合EGF样生长因子(HBEGF)核酸检测试剂盒 |
alpha Tubulin 微管蛋白α/Tubulin α/α-tubulin单克隆抗体 | 大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)PCR检测试剂盒 |
AF647标记人CD25单克隆抗体 | 小鼠甲状腺球蛋白(TG)核酸检测试剂盒 |
FKBP11 肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP11抗体 | 大鼠基质金属蛋白酶8(MMP8)PCR检测试剂盒 |
激肽释放酶15抗体 | 小鼠CD30分子(CD30)核酸检测试剂盒 |
NAT2 N-乙酰基转移酶2抗体 | 人ADP-核糖基化因子4(ARF4)PCR检测试剂盒免费代测 |
蛛毒素受体抗体 | 小鼠足盂蛋白(PCX)PCR检测试剂盒 |
HSP27 热休克蛋白27抗体 | 大鼠雌二醇(E2)抗体核酸检测试剂盒 |
腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1/AMPK α 1单克隆抗体 | 糖原磷酸化酶b(GPb)试剂盒 |
小鼠神经调节蛋白4(NRG4)PCR检测试剂盒 | 莫氏立克次体核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)类人猿PCR检测试剂盒 |
大鼠神经元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)PCR检测试剂盒 | 小鼠叉头框蛋白M1(FOXM1)PCR检测试剂盒 |
人白介素1受体样1(IL1RL1)核酸检测试剂盒 | 猪巨噬细胞迁移抑制因子(糖基化抑制因子)(MIF)PCR检测试剂盒免费代测 |
注意事项
实验操作规范
严格分区操作:试剂配制区、样本处理区、扩增区需物理隔离,防止气溶胶污染。
每次实验需设置阴性对照(无模板DNA)、阳性对照(已知PAT基因样本)及空白对照(仅缓冲液)。
加样时避免过量或不足,推荐低容量反应管以提高热传导率。
污染防控
定期监测实验室空气、加样枪及仪器表面污染,可通过擦拭采样后扩增验证。
扩增产物需在专用区域处理,避免开盖时形成气溶胶污染。
关键字: 莫氏立克次体; 荧光PCR法;核酸检测试剂盒;
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