产品介绍：
猪伪狂犬病病毒gE/gD核酸检测试剂盒（双重荧光PCR法）是一种用于定性检测猪临床样本中是否存在猪伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus, PRV）的分子生物学产品。该方法基于多重实时荧光定量聚合酶链式反应（Multiplex Real-time PCR）技术，能够在同一反应体系中同时扩增和区分PRV的gE基因（野毒感染标志）和gD基因（病毒通用标志），为猪场伪狂犬病的精准诊断、野毒感染监测及疫苗免疫效果评估提供快速、准确的实验室依据。
伪狂犬病是猪的重要疫病之一，给养猪业造成巨大经济损失。目前使用的基因缺失疫苗（如gE基因缺失疫苗）使得区分疫苗免疫猪和野毒感染猪成为可能。本试剂盒通过双重检测，既能确认是否感染病毒（检测gD），又能判断是否为野毒感染（检测gE），对于猪场的生物安全防控和净化工作具有重要意义。
产品名称 | 猪伪狂犬病病毒gE/gD（PRV-gE/PRV-gD)核酸检测试剂盒（双重荧光PCR法） |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3963 |
基本原理
该试剂盒的核心原理是双重实时荧光定量PCR（Multiplex qPCR），具体流程如下：
DNA提取：从待测样品（如猪的全血、组织、鼻拭子等）中提取总DNA。
双重PCR扩增：利用针对PRV gE基因（gE基因缺失疫苗株为阴性）和gD基因（所有PRV毒株均含有）特异序列设计的两对引物和两种不同荧光标记的探针（如FAM和HEX/VIC标记），在同一个反应管中同步进行扩增。
内标（IC）质控：试剂盒通常包含一个内标（Internal Control）系统（如ROX或CY5标记）。内标用于监控整个样本处理、核酸提取及PCR扩增过程是否成功，防止因操作失误或样本中存在抑制物（如血红素、肝素）导致的假阴性结果。
实时检测与判读：在扩增过程中，随着靶标DNA片段的指数级增加，对应的荧光信号也随之增强。仪器实时监测各通道（FAM、VIC、CY5）的荧光信号，根据扩增曲线和设定的阈值（Ct值）判定结果。
检测靶标与特异性
靶标基因：
gD基因（通用型检测）：编码病毒的主要囊膜糖蛋白，高度保守，存在于所有PRV毒株（包括疫苗株和野毒株）中。检测gD基因用于确认是否感染了伪狂犬病毒。
gE基因（野毒株检测）：编码病毒的另一种囊膜糖蛋白。目前广泛使用的基因缺失疫苗（如Bartha-K61株）通常缺失gE基因。因此，检测出gE基因通常代表猪群受到了野毒株的感染。
高特异性：该方法能特异性地检测PRV的gE和gD基因，与猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV-2）等其他常见猪病病原体无交叉反应，确保检测结果的准确性。
标本类型与处理
标本类型：
精液：公猪精液样本。
临床样本：猪的全血（抗凝）、血清、鼻拭子、咽拭子、脑组织、扁桃体、肺脏、脾脏等组织。
精液：公猪精液样本。
样本处理：
血液/拭子：取抗凝血或拭子洗脱液直接提取DNA。
组织：需研磨成匀浆后提取DNA。
注意：样本应避免反复冻融，提取后的DNA建议立即检测或在-20℃以下保存。
应用价值
该双重检测试剂盒在养猪生产和疫病防控中具有重要的应用价值：
野毒感染监测与鉴别诊断：能够有效区分接种gE基因缺失疫苗的免疫猪和野毒感染猪，这是进行猪场伪狂犬病净化工作的核心手段。
临床辅助诊断：对于出现神经症状、繁殖障碍或呼吸道症状的猪群，快速确诊是否由伪狂犬病毒引起。
疫苗免疫效果评估：结合gB抗体检测（用于评估疫苗免疫水平），通过gE检测监控猪群是否受到野毒攻击，从而评估生物安全措施的有效性。
种猪场净化：用于种猪群的定期监测，及时剔除gE基因阳性（野毒感染）个体，建立阴性核心群。
�� 优势与局限性
优势
高特异性与灵敏度：检测下限通常可达 1×10³ copies/mL，能有效检出样品中微量的病毒DNA。
多重检测：一次反应同时完成野毒和病毒通用检测，提高了检测效率，节省了样本和时间成本。
双重质控：通过内标（IC）的设置，确保了结果的可靠性，有效避免了假阴性结果的产生。
快速高效：整个PCR过程（不含DNA提取）通常在1.5-2小时内完成，闭管操作，降低了污染风险。
局限性
无法区分死/活病毒：检测出阳性仅表明样品中含有病毒DNA，但无法确定病毒是否具有感染性（活病毒）。
实验室要求高：需要具备荧光定量PCR仪（需具备至少3个荧光通道）和专业的分子生物学技术人员。
疫苗干扰：虽然gE检测可区分野毒，但若使用非gE缺失的疫苗（较少见），可能会导致gE检测呈阳性，需结合免疫记录进行判断。
核心优势与技术要点：
高特异性
引物设计基于目标基因保守区域，可区分高度同源序列（如病毒变异株）。
高灵敏度
检测限低至10拷贝/反应，适用于微量样本。
高效扩增
热启动酶（如HotStarTaq）减少非特异性扩增，30分钟内完成40个循环。
防污染设计
UNG酶系统降解残留产物，避免交叉污染。
稳定性提升
冻干预混技术实现常温运输，操作便捷。
公司正在出售的产品：
酪氨酸蛋白磷酸酶非受体2型单克隆抗体 | IER2, Alexa Fluor 680 conjugated AF680标记的即刻早期应答基因2蛋白抗体 |
锌指蛋白689抗体 | Bcl2样凋亡蛋白9抗体 |
phospho-JNK1 + 2 + 3 (Thr183+Tyr185) 磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗体 | FAM82A1 微管动力调节蛋白FAM82A抗体 |
乙酰化化组蛋白H2B (Lys120)鼠单克隆抗体 | 大鼠CXC趋化因子受体4(CXCR4)核酸检测试剂盒 |
phospho-MYBL2 (Thr487) 磷酸化转录因子MYB相关蛋白B抗体 | 人高密度脂蛋白3(HDL3)核酸检测试剂盒 |
SAMD7 SAMD7蛋白抗体 | 大鼠转铁蛋白受体(TFR)PCR检测试剂盒 |
接触蛋白抗体 | 小鼠解整合素金属蛋白酶8(ADAM8)PCR检测试剂盒 |
PRDM13 PRDM锌指转录因子PRDM13抗体 | 大鼠甲胎蛋白(αFP)PCR检测试剂盒 |
19号染色体开放阅读框2抗体 | 小鼠Dickkopf相关蛋白4(DKK4)PCR检测试剂盒 |
ADAMTS5 软骨蛋白聚糖抗体 | 人B细胞淋巴瘤因子2（BLC-2）PCR检测试剂盒 |
谷胱甘肽硫转移酶ω1/glutathione S transferase Omega 1抗体 | 血清蛋白提取试剂盒50T |
HORMAD1 HORMAD1蛋白抗体 | 大鼠促胰液素/胰泌素(Sct)核酸检测试剂盒 |
氨基末端激酶2重组兔单克隆抗体 | 土壤硝态氮测试盒 |
小鼠生长抑素(SS)核酸检测试剂盒 | 猪伪狂犬病病毒gE/gD（PRV-gE/PRV-gD)核酸检测试剂盒（双重荧光PCR法）鹿内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)核酸检测试剂盒 |
大鼠瘦素（Leptin）PCR检测试剂盒 | 小鼠雌激素硫酸转移酶(SULT1E1)PCR检测试剂盒 |
人白介素4(IL-4)核酸检测试剂盒 | 猪热休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)PCR检测试剂盒免费代测 |
注意事项：
防污染操作
需在试剂准备区、样本处理区、扩增区独立操作，使用带滤芯吸头及专用实验服。
阳性对照管理
浓度高达1×10⁸拷贝/μL，需单独存放并避免污染其他试剂。
局限性
仅限科研使用，不可用于临床诊断；
环境样本中可能存在PCR抑制剂，需设置内参对照。
关键字： 猪伪狂犬病病毒gE/gD ;PRV-gE/PRV-gD ;双重荧光PCR法;核酸检测试剂盒;
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