产品介绍:
该试剂盒采用双重TaqMan-MGB探针技术,可同步特异性检测猪蓝耳病病毒欧洲型(Type 1,如Lelystad病毒)和美洲型(Type 2,如VR-2332株)的核酸,具有高灵敏度(最低检测限100-500拷贝/mL)、高特异性(≥99%)和快速检测(1.5-2小时)的特点,适用于猪场PRRSV分型检测、流行病学调查及疫苗免疫效果评估,但需注意其结果需结合临床症状综合判断且对样本质量要求高。
产品名称 | 猪蓝耳病毒欧洲株/美洲株核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法) | 货号 | AP4015 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
一、核心作用与检测原理
该试剂盒主要用于同步检测猪血清、肺组织、淋巴结、精液、口腔拭子及环境样本中的猪蓝耳病病毒欧洲株和美洲株,其核心原理基于:
双重靶标设计:针对欧洲株ORF7基因保守区和美洲株NSP2基因高变区设计特异性引物与探针,实现基因型特异性检测
荧光通道分配:采用双重TaqMan-MGB探针法,欧洲株检测通道(如FAM通道)和美洲株检测通道(如HEX通道)实现同步检测,部分试剂盒含内源性内标(如猪RNase P基因,Cy5标记)监控样本质量
技术优势:单管双重检测避免交叉污染,可有效区分欧洲型与美洲型病毒(二者基因组核苷酸同源性仅约60%),为PRRSV分型诊断提供依据
二、产品性能与规格参数
性能指标 参数说明
检测方法 双重TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR
规格 50T/盒
保存条件 -20℃避光保存,避免反复冻融(<5次)
有效期 12个月
适用仪器 ABI 7500、Bio-Rad CFX96、Roche LightCycler等主流荧光定量PCR仪
检测范围 2×10³~1×10⁸ copies/mL
最低检测限 1×10³ copies/mL(部分产品可达100-500拷贝/mL)
检测时效 1.5-2小时(含核酸提取)
特异性 ≥99%,不与犬、牛等其他常见动物DNA交叉反应
检测时效 1.5-2小时(含核酸提取)
三、操作流程与结果判读
核心操作步骤
样本处理:优先选择血清或肺淋巴结(避免溶血样本),使用RNA提取试剂盒提取核酸
试剂配制:按说明书比例混合反应液(含dNTP、缓冲液)和酶液(Taq DNA聚合酶),每管加入5μL模板核酸,终体积20μL
扩增程序:典型的扩增程序包括:
预变性:95℃ 2-5分钟
扩增:40个循环(95℃ 10-15秒 → 60℃ 30-45秒,荧光信号于60℃采集)
结果判读标准
欧洲株阳性:FAM通道Ct值≤36,扩增曲线呈明显指数增长
美洲株阳性:HEX通道Ct值≤36,扩增曲线呈明显指数增长
可疑结果:36<Ct值≤40,建议重复检测确认
实验有效性:阴性对照无扩增或Ct值>40,阳性对照Ct值≤32且呈"S"型曲线189
四、应用场景与核心优势
主要应用场景
分型检测:区分欧洲型与美洲型PRRSV感染,指导针对性防控
流行病学调查:监测猪场PRRSV流行株变化,追踪病毒遗传演化
疫苗评估:区分疫苗株与野毒株,评估疫苗免疫效果
引种检疫:检测引进种猪是否携带PRRSV,防止新毒株引入
核心优势
双重检测机制:单管反应同时检测两种基因型,提高检测效率,避免单一靶标检测的假阴性
高灵敏度:可检测低至1×10³ copies/mL的病毒载量,显著优于传统病毒培养法
特异性强:针对ORF7和NSP2基因的特异性保守区域设计引物,避免交叉反应
快速高效:1.5-2小时出结果,较传统病毒培养法(24-48小时)效率大幅提升
五、局限性与关键注意事项
无法区分活病毒:PCR检测不能区分活病毒与死病毒,阳性结果需结合临床症状和病毒分离结果综合判断
样本质量依赖:样本采集、运输和保存不当会导致RNA降解,影响检测结果,需使用病毒保存液并-80℃保存
基因变异影响:PRRSV为RNA病毒,其RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)缺乏校正功能,基因组在复制时容易发生突变,这可能导致引物结合位点改变,产生假阴性结果
窗口期限制:感染后病毒载量随时间变化,需在合适时间窗采样(急性感染期病毒载量最高)
疫苗干扰:活疫苗免疫后14天内可能检出阳性,需结合免疫史解读结果
公司正在出售的产品:
亚甲基四氢叶酸脱氢酶2抗体 | KCNF1 电压门控性钾通道蛋白亚基kv5.1抗体 |
FITC anti-mouse I-Ab | 二价金属转运蛋白1抗体 |
ZNF694 锌指蛋白694抗体 | ELF4 ELF4蛋白抗体 |
PerCP-Cy5.5标记人CD79a单克隆抗体 | Annexin V-FITC / 7-AAD 双染细胞凋亡检测试剂盒100T |
TNFAIP1 肿瘤坏死因子α诱导蛋白1抗体 | 人臂板蛋白4C(Sema 4C)PCR检测试剂盒 |
Phospho-RPS6KA1 (Ser380) 磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白重组兔单克隆抗体 | 大鼠糖原合酶激酶3α(GSK3α)PCR检测试剂盒 |
细胞角蛋白71抗体 | 小鼠蛋白C(PROC)PCR检测试剂盒 |
Gab1 接头蛋白Gab 1抗体 | 大鼠蛋白酶激活受体3(PAR3)PCR检测试剂盒 |
白介素-17B受体抗体 | 兔对氧磷酶-1(PON1)PCR检测试剂盒 |
CK18, Alexa Fluor 680 conjugated AF680标记的细胞角蛋白18抗体 | 马黄体生成素(LH)PCR检测试剂盒 |
生发中心激酶MAP4K2抗体 | 小鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)PCR检测试剂盒 |
Glutaredoxin 5 谷氧还蛋白5抗体 | 大鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)核酸检测试剂盒 |
前列腺细胞凋亡反应蛋白4抗体 | 人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)核酸检测试剂盒 |
小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)核酸检测试剂盒 | 猪蓝耳病毒欧洲株/美洲株核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法)蛋白酶抑制剂混合物(含EDTA)1ml |
大鼠金属硫蛋白(MT)核酸检测试剂盒 | 小鼠L1-细胞粘附分子(L1CAM)PCR检测试剂盒 |
人CD82分子(CD82)核酸检测试剂盒 | 杨梅素含量测试盒 |
应用场景与产品选择建议
科研领域:
常规PCR试剂盒。
临床诊断:
探针法qPCR试剂盒(如牛白血病病毒,灵敏度100拷贝/反应)。
现场检测:
恒温扩增试剂盒(如LAMP法,90分钟出结果)
关键字: 猪蓝耳病毒欧洲株/美洲株 ;双重荧光PCR法;核酸检测试剂盒;
上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家化学、生化和材料科学等领域的科研用研发产品的制造商和供应商, 我们的产品在相当宽的基础科学领域得到广泛的应用。客户包括学术界、工业界和政府的研究和开发实验室以及制药,生物技术,化工/石化行业等具商业规模的企业。
上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)除包括化学、分析化学、生命科学和材料科学阿凡提(affandi)产品线外。 质量是所有产品和服务最关键的组成部分,我们通过质量和实力赢得客户的信赖。产品的质量是企业的生命。
上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一个值得信赖的,以服务为导向的公司。产品质量是我们的立身之本, 但提供给客户的远不止产品本身,现货库存、包装、应急反应、客户的技术支持等等因素能满足和超越您的期望对我们是同样重要的。我们建立的质量管理流程保证 了高水准的服务和不断追求完美的承诺。对于大多数目录产品库存,可保证当天或第一时间发货,我们也逐渐建立一支业务精炼、服务周到的客服队伍,把满足客户的 需求作为自己的工作宗旨,运用各种方式来满足客户的需求,服务渗透到售前、售中、售后,甚至延伸产品本身之外,我们争取做到出售的不再是简单的产品,而是服务。
上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、 华东师范大学、第二军医大学、南京大学,暨南大学,南京工业大学,曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。
本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒; 另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。