重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human AMPK alpha 1 是一种在大肠杆菌中表达的、带有N端His标签的人源蛋白激酶片段(1-279 aa),作为细胞能量代谢的关键调节因子,主要用于研究能量代谢调控及药物筛选。
产品名 | Recombinant Human AMPK alpha 1 | 分子量 | 30.6 kDa |
表达区间 | 1-279 | 货号 | XG-DB1170 |
别名
5 AMP activated protein kinase alpha 1catalytic subunit, 5 AMP activated protein kinase catalytic alpha 1 chain, 5' AMP activated protein kinase catalytic subunit alpha 1, 5'-AMP-activated protein kinase catalytic subunit alpha-1, AAPK1, AAPK1_HUMAN, ACACA kinase, acetyl CoA carboxylase kinase, AI194361, AI450832, AL024255, AMP -activate kinase alpha 1 subunit, AMP-activate kinase alpha 1 subunit
宿主; E.Coli
表达区间; 1-279
分子量; 30.6 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
骨骼肌烯醇化酶抗体 | PE标记大鼠CD8a单克隆抗体 |
棕榈酰蛋白水解酶2抗体 | AF488标记的网格蛋白重链抗体 |
通用转录因子3A | 葡萄球菌110肉汤 |
酪氨酸磷酸酶α抗体 | 全组织免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒(含AP一抗) |
组织基质金属(MMP-3)活性比色法定量检测试剂盒 | CASPASE-8蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
组织脂蛋白相关磷脂酶A2(LP PLA2)活性比色法定量检测试剂盒 | 白细胞分类染色试剂盒 |
动物细胞周期S早期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒 | WBP2蛋白抗体 |
picric acid-orange G solution 溶液 | HHO1蛋白抗体 |
饮料L-苹果酸比色法定量检测试剂盒 | FAM119A蛋白抗体 |
?10毫升玻璃匀浆器 | 脑蛋白239抗体 |
细菌脱氧胆酸盐琼脂平板 | 促肾上腺皮质激素受体 |
冰冻切片组织EGFR 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | Recombinant Human AMPK alpha 1异染色质蛋白1结合蛋白3抗体 |
间隙连接蛋白10抗体 | Ⅰ型补体受体(C3b/C4b受体)抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: AMPK alpha 1;30.6 kDa; 1-279;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。