重组蛋白(Recombinant Protein):

是指利用重组DNA或RNA技术,在体外人工制造的蛋白质。
这项技术通过将编码特定目标蛋白的基因片段,插入到重组表达载体中,然后导入宿主细胞(如细菌、酵母、哺乳动物细胞等),
利用宿主细胞的“蛋白质工厂”来生产出大量的、具有特定生物学活性的蛋白质。
产品概述:

Recombinant Human APG5L (ATG5) 是一种在大肠杆菌中表达的、带有N端His标签的人源自噬相关蛋白,作为自噬体形成的关键组分,它通过与ATG12结合介导自噬体膜的延伸,是研究细胞自噬机制的核心蛋白。
产品名称; Recombinant Human APG5L
别名; APG 5, APG 5L, APG5, APG5 autophagy 5 like, APG5 like, APG5-like, APG5L, Apoptosis specific protein, Apoptosis-specific protein, ASP, ATG 5, Atg5, ATG5 autophagy related 5 homolog, ATG5_HUMAN, Autophagy protein 5, Autophagy related 5, hAPG5, Homolog of S Cerevisiae autophagy 5, OTTHUMP00000040507
宿主; E.Coli
表达区间; 1-275
分子量; 30.1 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
公司正在出售的产品:

肝癌上调蛋白抗体 | RASGEF1C蛋白抗体 |
轴突生长诱向因子G1配体抗体 | G-17单克隆抗体(检测抗体) |
突触结合蛋白11抗体 | 通用型大肠杆菌(E. Coli)鉴定 |
类固醇脱氢酶样蛋白1抗体 | 活体细胞半胱(CASPASE)总活性原位荧光染色检测试剂盒 |
细胞基质金属(MMP-9)琥珀酰明胶法比色定量检测试剂盒 | 细胞CASPASE-3蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 |
组织硝酸盐含量荧光定量检测试剂盒 | 体液氧化型甘肽(GSSG)浓度比色法定量检测试剂盒 |
冰冻切片组织衰老特异性早期脂褐素油性红原位染色试剂盒 | Wnt1信号通路蛋白1抗体 |
20 倍 SSC分子生物级浓缩缓冲溶液 | KPNA5蛋白抗体 |
饮料L-乳酸比色法定量检测试剂盒 | DHX35蛋白抗体 |
40%ACRYLAMIDE溶液 | 脑蛋白44抗体 |
PA317包装细胞克隆选择培养基 | 超氧化物歧化酶1(铜/锌过氧化物歧化酶SOD抗体 |
冰冻切片组织NF KAPPA B P65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | Recombinant Human APG5L嗅觉受体5H6抗体 |
急性髓细胞白血病1蛋白抗体 | 3号染色体开放阅读框77抗体 |
存储条件:

冻干状态: 存储于-20°C以下,可稳定保存长达12个月。
复溶后: 在2-8°C下可保存1个月,需保持无菌环境。
注意事项: 避免反复冻融,以防止蛋白降解或活性损失。
关键字: APG5L;30.1 kDa; 1-275;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。