重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human ATG5 是一种在酵母或大肠杆菌中表达的、带有标签的人源全长重组蛋白(1-275 aa),作为自噬关键E3连接酶复合物的核心组分,广泛用于自噬机制、细胞凋亡及肿瘤生物学的研究。
产品名 | Recombinant Human ATG5 | 分子量 | 36.9 KDa |
表达区间 | 138-275 | 货号 | XG-DB1282 |
别名
APG5 autophagy 5-like (S. cerevisiae); APG5; APG5LS. cerevisiae)-like; ASP; ASPAPG5-LIKE; ATG5 autophagy related 5 homolog (S. cerevisiae); ATG5; Autophagy protein 5
宿主; E.Coli
表达区间; 138-275
分子量; 36.9 KDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
肝再生磷酸酯酶2抗体 | PE-Cy5标记人CD62E/CD62P单克隆抗体 |
转位蛋白相关X因子抗体 | 兔抗磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MARK3单克隆抗体 |
糖类应答元件结合蛋白ChREBP抗体 | 细菌糖酵解MRVP检测试剂盒 |
淋巴细胞胞浆蛋白LCP1抗体 | 组蛋白H4-K16乙酰化检测试剂盒 |
细胞PRAK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | ?COLLAGEN III蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
组织SPHK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | Dystrophin |
(紫外波长,无需固定和透膜处理) | ZDBF2蛋白抗体 |
玻璃清洁剂(橱窗、大门、汽车玻璃等) | G蛋白偶联受体GPR158蛋白抗体 |
肉类氟元素比色法定量检测试剂盒 | FAM105A蛋白抗体 |
药品环(cyclamate)含量薄层色谱法定性检测试剂盒 | 内皮粘蛋白EMCN抗体 |
体液科萨基病毒B(Coxsackievirus B)定量PCR扩增检测试剂盒 | 蛋白酪氨酸磷酸酶亩mu抗体 |
载玻片细胞CASPASE-8蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | Recombinant Human ATG5胰岛细胞再生因子ICRF抗体 |
激活激酶PAK7抗体 | AF647标记人CD105单克隆抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: ATG5;36.9 KDa; 138-275;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。