重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human CA9(重组人碳酸酐酶9)是指在大肠杆菌中表达的、带GST标签的人源蛋白(氨基酸64-399),作为一种受缺氧诱导的锌金属酶,它通过调节细胞内外pH值稳态,在肾细胞癌等多种肿瘤的增殖、黏附及耐药性中发挥关键作用。
产品名 | Recombinant Human CA9 | 分子量 | 33.4 KDa |
表达区间 | 38-153 | 货号 | XG-DB1418 |
别名
CA9; CAIX; CA-IX; Carbonate dehydratase IX; carbonic anhydrase 9; Carbonic Anhydrase IX; carbonic dehydratase; EC 4.2.1.1; G250; Membrane antigen MN; MN; P54/58N; PMW1; RCC; RCC-associated antigen G250; RCC-associated protein G250; Renal cell carcinoma-associated antigen G250
宿主; E.Coli
表达区间; 38-153
分子量; 33.4 KDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
高尔基体自身蛋白8J抗体 | RNA结合蛋白42抗体 |
转导β样蛋白1抗体 | AF750标记的卷曲螺旋结构域蛋白98抗体 |
脱氧核糖核酸酶γ抗体 | PH7-8显色(PHENOL RED)指示溶液 |
磷酸化CD244抗体 | 同位素法DNA南方杂交试剂盒 |
体液肌酸激酶同工酶脑型(CK--BB)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒 | 载玻片细胞CDK6蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
细菌F型ATP酶(F type ATPase)活性比色法定量检测试剂盒 | 细胞琥珀酸脱氢酶活性染色试剂盒 |
全血线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 | β2-微球蛋白抗体 |
超敏型ECL免疫印迹化学发光溶液 | IRE1蛋白抗体 |
饮料氨一步法定量检测试剂盒 | FAM49B蛋白抗体 |
组织亮(leucine)含量比色法定量检测试剂盒 | 鸟嘌呤核苷酸交换因子rasgef1a抗体 |
通用型科萨基病毒B(Coxsackievirus B)定性检测试剂盒 | 短链脱氢酶/还原酶家族9抗体 |
INSULIN 蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | Recombinant Human CA9羊毛甾醇14α-去甲基化酶蛋白抗体 |
激肽原1重链抗体 | Bcl-2结合抑凋亡蛋白2抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: CA9;33.4 KDa; 38-153;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。