重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human Calreticulin-3(重组人钙网蛋白-3)是指在大肠杆菌中表达的一种重组蛋白,作为内质网中高度保守的钙结合分子伴侣,它参与调节细胞内钙稳态和蛋白质质量控制。
产品名 | Recombinant Human Calreticulin 3 | 分子量 | 40 kDa |
表达区间 | 20-384 | 货号 | XG-DB1435 |
别名
CALR 3, CALR3, CALR3_HUMAN, Calreticulin 2, Calreticulin-2, Calreticulin-3, Calreticulin2, Calreticulin3, Calsperin, Cancer/testis antigen 93, CMH19, CRT2, CT93, FLJ25355, MGC26577
宿主; E.Coli
表达区间; 20-384
分子量; 40 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
高迁移率族蛋白2抗体 | PRTFDC1蛋白抗体 |
转录因子TBX6抗体 | Cy5标记的网格蛋白重链抗体 |
透明质酸及粘蛋白4抗体 | 组织脯肽酶(prolidase;PLD)克林纳(Chinard)比色法 |
磷酸化C端结合蛋白1抗体 | 肝脂酶活性比色法定量检测试剂盒 |
体液基质金属(MMP-9)免疫捕获检测试剂盒 | PLASMIN STREPTOKINASE COMPLEX |
P300组蛋白乙酰转移酶(HAT)活性荧光定量检测试剂盒 | 冰冻切片总游离菲律宾(FILIPIN)荧光染色试剂盒 |
无激素胎牛血清(活性碳/葡聚糖处理) | α-L岩藻糖苷酶2抗体 |
FITC蛋白标记试剂盒 | Kelch样蛋白36抗体 |
饮料比色法定量检测试剂盒 | FAM61B蛋白抗体 |
化妆品乙酰舒泛(acesulfame K)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 | 镁转运蛋白NIPAL4抗体 |
中量真菌/酵母细胞基因组DNA纯化试剂盒 | 端粒酶反转录酶抗体 |
INSULIN R-ALPHA 蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | Recombinant Human Calreticulin 3原癌基因cMAF抗体 |
甲状腺素结合球蛋白抗体 | 2号染色体开放阅抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: Calreticulin 3;40 kDa; 20-384;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。