人绒毛膜促性腺激素抗体(HCG-IgG)ELISA试剂盒
产品货号：LM8K7141H
产品规格：48T/96T
适用范围：本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断，适用于人血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及其它生物体液。
检测原理：试剂盒采用双抗原夹心法原理：将捕获抗原包被于酶标板上，加入样品，样品中的抗体被捕获，结合形成“抗原-抗体”免疫复合物，清洗去除游离的杂质，再加入HRP标记的酶标记的检测抗原，形成“抗原-抗体-酶标抗原”夹心复合物，清洗去除多余的杂质，加入TMB显色，再加入终止液，用酶标仪在450nm处测OD值，颜色的深浅和样品中的待测抗原浓度呈正比。
需要但未包含的实验材料
·蒸馏水或去离子水，一次性离心管、一次性手套等耗材；
·移液器、多通道移液器及配套枪头；
·烧杯、量筒、试剂瓶等容器具；
·用于封贴微孔板的封板膜或其他替代材料；
·微孔板振荡器（如有需要）、离心机、旋涡振荡器等辅助设备；
·恒温培养箱、恒温水浴箱、酶标仪、洗板机。
试剂的准备及储存
·试剂盒各组分应储存于2~8°C保存；
·使用前请确保试剂盒按规定的条件储存，每次实验仅准备所需实验用量的试剂；
·1X洗液的配制：浓缩洗液（20×）如有晶体析出，需在37°C下加热至晶体全部溶解后使用。用蒸馏水1:20稀释，例如：10mL浓缩洗涤液加入190mL的蒸馏水，混合均匀。配制好的洗液可以在室温保存1周；
样品采集、预处理及储存
下面列出的样品收集和储存条件旨在作为一般性指导，不同类型样品的储存、使用稳定性尚未完全评估。
·血清：使用血清采集管采集全血，室温静置待血细胞凝集后取的血清，或直接在1000×g下离心15分钟取得血清。操作应柔和，避免溶血发生。获取的血清应及时进行检测，如不能及时进行检测，应等分为多份，储存在-20℃及以下温度条件，储存时间不超过6个月，
冷冻储存血清样品冻融不超过2次。
·血浆：使用EDTA或肝素采血管收集血浆。全血采集后以1000×g离心15分钟取得血浆。操作应柔和，避免溶血发生。获取的血浆应及时进行检测，如不能及时进行检测，应等分为多份，储存在-20°℃C及以下温度条件，储存时间不超过6个月，冷冻储存血浆样品冻融不超过2次。
·不能检测含叠氮钠、悬浮纤维蛋白或聚集物、重度溶血样品。
·样品应无微生物污染。
实验步骤
使用前将所有试剂置于室温平衡30分钟左右，也可置于37℃C温箱快速回温至室温。注意：酶标板未恢复室温前，请勿开封。
1、合理安排阳性对照孔、阴性对照孔、样品孔。
2、阳性对照孔加入阳性对照100uL，阴性对照孔加入阴性对照100uL。阴阳对照各设置2孔。
3、样本孔先加入样品稀释液80uL，再加入样本20uL。
4、盖上封板膜，在37°C下孵育30分钟。
5、洗板5次，最后一次洗板后弃去残留洗液，倒扣酶标板，在干净的吸水纸上拍干。
6、每孔加入酶结合物工作液100μL。
7、盖上封板膜，在37°C下孵育30分钟。
8、洗板5次，最后一次洗板后弃去残留洗液，倒扣酶标板，在干净的吸水纸上拍干。
9、每孔加入显色剂100uL。
10、37°C下避光孵育15**分钟。
11、每孔加入终止液50μL。
12、使用酶标仪在450nm检测波长及620~690nm参比波长条件下测定吸光度值，如果没有参比波长则仅选择450nm波长进行检测。如果最高浓度校准品OD值过高，应立即在405/630nm双波长条件下检测。
阳性判断值Cut-Off
Cut-Off=阴性对照孔平均OD值X2.1（阴性对照孔OD均值小于0.050时，按0.050计算）。
例：阴性对照孔平均OD值为0.100，则Cut-OFF值=0.100X2.1=0.210；阴性对照孔平均OD值为0.020，则Cut-OFF值=0.050X2.1=0.105。
结果判断
阳性结果：样本OD值>Cut-OFF值，结果判为阳性；
阴性结果：样本OD值<Cut-OFF值，结果判为阴性；
检测的局限性
样本浓度低于检出限时，检测结果无法进行准确判断。本试剂为定性试剂，不能作为定量试剂使用。
产品性能指标
以下结果基于校准品的浓度值实验得出，未纳入基质效应等其他因素的潜在影响。检测3份企业阳性参考品，结果均为阳性。检测3份企业阴性参考品，结果均为阴性。
精密度：板内精密度CV<10%(N=20），板间精密度CV<15%(N=20）。
特异性（Analyticalspecificity）：其他相关因子在稀释缓冲液中制备为1Oμg/mL测定，没有观察到明显的交叉反应。
特别提示：仅供科研使用，不得用于临床检验及治疗使用 ，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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