猪流行性腹泻病毒抗原(PEDV-Ag)ELISA试剂盒
货号:LM8K678P
规格:48T/96T
种属:猪
范围:11 U/L -380 U/L
使用目的：本试剂盒用于测定猪血清及相关液体样本中流 行性腹泻病毒抗原（PEDV-Ag）含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪流行 性腹泻病毒抗原（PEDV-Ag）水平。用纯化的抗体包 被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次 加入流行性腹泻病毒抗原（PEDV-Ag），再与 HRP 标 记的抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经 过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化 下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 流 行 性 腹 泻 病 毒 抗 原 （PEDV-Ag）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测 定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中猪流行 性腹泻病毒抗原（PEDV-Ag）浓度。
试剂盒组成
| 序号 | 组分 | 数量 |
| 1 | 30 倍浓缩洗涤液 | 20ml × 1 瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml × 1 瓶 |
| 3 | 酶 标 包 被 板 | 12 孔 × 8 条 |
| 4 | 样 品 稀 释 液 | 6ml × 1/ 瓶 |
| 5 | 显 色 剂 A 液 | 6ml × 1/ 瓶 |
| 6 | 显 色 剂 B 液 | 6ml × 1/ 瓶 |
| 7 | 终止液 | 6ml × 1 瓶 |
| 8 | 标 准 品 （ 720 U/L） | 0.5ml×1 瓶 |
| 9 | 标准品稀 释液 | 1.5ml×1 瓶 |
10
| 封板膜 | 2张 |
| 11 | 密封袋 | 1个 |
| 12 | 说明书 | 1份 |
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献 进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避 免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根 过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支， 用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶 标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样 品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl， 待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加 待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。加 样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁， 轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后 备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔 加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 10 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝 色立转黄色）。
11. 测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔 的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐 标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线 查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓 度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样 品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀 释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分 钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板 条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中 加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性， 以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分 钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如 标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品 孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定 倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀 释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须 以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处 第 5 页 共 8 页理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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