操作要点:

电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
产品概述:

Recombinant Human Carbonic Anhydrase 7(重组人碳酸酐酶7)是指在大肠杆菌中表达的、带有C端His标签的人源蛋白(氨基酸1-264),作为一种胞质锌金属酶,它不仅催化二氧化碳的可逆水合反应,还在脑缺血后神经元酸中毒及氧化应激防御中发挥关键作用。
产品名称; Recombinant Human Carbonic Anhydrase 7
别名; CA 7, CA VII, CA-VII, Ca7, CAH7_HUMAN, Carbonate dehydratase VII, Carbonic anhydrase 7, Carbonic anhydrase VII, Carbonic dehydratase VII, CAVII, EC=4.2.1.1
宿主; E.Coli
表达区间; 1-264
分子量; 28.9 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用说明:

复溶方法: 使用无菌蒸馏水或PBS缓冲液(pH 7.4)溶解冻干粉,轻轻混匀至完全溶解。
应用建议:
实验用途: 适用于Western Blot、ELISA等检测,作为抗原或标准品。
浓度调整: 根据实验需求稀释,避免高浓度导致非特异性结合。
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
重组表达原理:

基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
公司正在出售的产品:

孤儿核受体蛋白Nur77抗体 | PE标记小鼠CD62L单克隆抗体 |
转录因子Gli2抗体 | AF680标记的转录因子Pax6抗体 |
肽脱甲酰基酶PDF抗体 | 前列F2a(PGF2a)高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
磷酸化eIF4E结合蛋白抗体 | 总L-高半胱(Hcy)定量检测试剂盒 |
细胞TIE2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 载玻片细胞CDK4蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
细菌磷脂酶D2(Phospholipase D2)活性荧光定量检测试剂盒 | 冰冻切片溶酶体脂酶(酸性脂酶)活性染色试剂盒 |
完全线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRM)测定试剂盒 | β淀粉样肽1-28/β-Amyloid 1-28抗体 |
蛋白质西方杂交10倍清理缓冲液 | IQCF1蛋白抗体 |
植物支链淀粉比色法定量检测试剂盒 | Fas死亡结构域相关蛋白抗体 |
组织半胱(cysteine)含量比色法定量检测试剂盒 | 脑和急性白血病胞浆蛋白抗体 |
细菌硫酸氢铋选择琼脂平板 | 单核细胞趋化蛋白5抗体 |
冰冻切片组织MYC蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | Recombinant Human Carbonic Anhydrase 7乙型肝炎病毒X蛋白 (HBX) 抗体 |
甲状腺激素受体相互作用11抗体 | 3号染色体开放阅读框54抗体 |
重组蛋白生产流程:

通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
关键字: Carbonic Anhydrase 7;28.9 kDa; 1-264;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。