重组蛋白生产流程:
通常包括以下几个核心步骤:
基因克隆:首先,科学家需要获取编码目标蛋白的特定基因序列(目的基因)。
构建载体:将目的基因插入到一个被称为“载体”的DNA分子中,这个载体就像是一个运输工具,
能将目的基因送入宿主细胞并指导其表达。
转入宿主:将构建好的重组载体导入选定的宿主细胞中,这个过程称为“转化”或“转染”。
表达与培养:宿主细胞在适宜的条件下进行大规模培养,其自身的遗传系统会读取重组载体上的基因信息,开始大量生产目标蛋白。
纯化:通过一系列复杂的生物化学方法(如层析技术),将目标重组蛋白从宿主细胞的众多混合物中分离出来,以获得高纯度的产品。
产品概述:
Recombinant Human DAG1(重组人 DAG1 蛋白),全称为肌营养不良蛋白关联糖蛋白 1(Dystroglycan 1),是一种通过基因工程技术在原核表达系统(通常为大肠杆菌)中生产的蛋白质。它对应于人体内的 DAG1 基因编码的天然蛋白,是肌营养不良蛋白-糖蛋白复合物(Dystrophin-Glycoprotein Complex, DGC)的核心跨膜组分。
产品名 | Recombinant Human DAG1 | 分子量 | 51.3 kDa |
表达区间 | 30-312 | 货号 | XG-DB1733 |
别名
156DAG, A3a, Agrin receptor, AGRNR, Alpha-DG, alpha-DG-N, Beta-DG, Beta-dystroglycan, DAG, Dag1, DAG1_HUMAN, Dystroglycan, Dystroglycan 1 (dystrophin-associated glycoprotein 1), Dystroglycan, alpha, Dystrophin-associated glycoprotein 1, MDDGC7, MDDGC9, OTTHUMP00000210857, OTTHUMP00000210858
宿主; E.Coli
表达区间; 30-312
分子量; 51.3 kDa
标签; N-terminal His-IF2DI Tag
纯度; Greater than 90% by SDS-PAGE gel analyses
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
操作要点:
电泳条件:使用15% SDS-PAGE凝胶,以提高对小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
转膜参数:采用湿转法,100 V、60–90分钟(4°C),使用PVDF膜(需甲醇预活化)。
抗体选择:
一抗:抗CST3多克隆抗体(如兔源抗体),推荐稀释比为1:1000。
二抗:HRP标记的山羊抗兔IgG,稀释比1:10,000。
显色方式:ECL化学发光法,预期条带位于~13.4 kDa处。
内参建议:由于CST3分子量较小,可选用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作为内参,避免条带重叠。
注意事项:
安全提示: 操作时需佩戴手套和护目镜,遵循实验室生物安全规范。
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
公司正在出售的产品:
冠状病毒刺突糖蛋白抗体 | RHOJ蛋白抗体 |
肿瘤坏死因子受体超家族成员9抗体 | 小鼠抗人CD3单克隆抗体 |
微纤丝相关糖蛋白抗体 | 酵母镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒 |
磷酸化蛋白激酶C亚性抗体 | 血液一氧化氮合成酶总活性酶动力比色法定量检测试剂盒 |
组织样品组织D(CATHEPSIN D)活性比色法定量检测试剂盒 | 冰冻切片铜荧光(CSI)染色试剂盒 |
组织AURORA-C激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 人补体蛋白C3标准溶液 |
动物小肠组织细胞分离培养试剂盒 | Toll样受体7抗体 |
通用型微型RNA(miRNA)扩增试剂盒 | LSM8蛋白抗体 |
植物乙醇酸氧化酶(glycolate oxidase)活性比色法定量检测试剂盒 | DTX4蛋白抗体 |
通用型山羊关节炎脑炎病毒梅迪-维斯纳病毒(Caprine Arthritis Encephalitis Virus/Maedi-Visna Virus;CAEV/MVV) | 磷酸乙醇胺转移酶A抗体 |
质粒/蛋白制备样品内毒素凝胶法定量检测试剂盒 | 多配体蛋白聚糖1(CD138)抗体 |
钙钠交换体(NCX)蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 | Recombinant Human DAG1胰岛素样生长因子结合蛋白2抗体 |
腱糖蛋白R抗体 | 5-羟色胺受体2A抗体 |
关键字: DAG1;51.3 kDa; 30-312;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
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