细胞简介:

大鼠肺微血管内皮细胞分离自肺组织;肺是机体的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆盖于心之上。肺有分叶,左二右三,共五叶。肺经肺系(指气管、支气管等)与喉、鼻相连,故称喉为肺之门户,鼻为肺之外窍。微血管内皮细胞密切参与包括再生、发育、伤口愈合等一系列生理及炎症反应。细胞呈梭形或多角形,形成单层后呈鹅卵石样或铺路石样排列。肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障,该屏障对于肺气体交换,调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。
产品名称 | 大鼠肺微血管内皮细胞 | 产品货号 | P-X1515 |
英文名称 | Rat Pulmonary Microvascular Endothelial Cells | 规格 | 5×10^5 |
报告 | 提供免疫荧光鉴定报告 | 组织来源 | 肺组织 |
产品信息:

方法简介:实验室分离的大鼠肺微血管内皮细胞采用组织贴块法并结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的大鼠肺微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:大鼠肺微血管内皮细胞
组织来源:肺组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件PLL(0.1mg/ml)或明胶(0.1%)
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:内皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶大鼠肺微血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞接种:

细胞计数与密度调整
使用血球计数板或细胞计数仪准确计数,调整细胞密度至合适范围(不同细胞类型差异较大,一般为1×10⁵-1×10⁶cells/ml)
密度过低:细胞无法分泌足够的生长因子,难以存活;密度过高:细胞竞争营养物质,易出现接触抑制
培养基选择
优先使用原代细胞专用培养基,若使用通用培养基,需添加合适的生长因子、血清等补充成分(如成纤维细胞添加FGF,内皮细胞添加VEGF)
血清浓度:原代细胞培养血清浓度一般为10%-20%,部分特殊细胞(如神经细胞)需使用无血清培养基
培养环境控制
温度:哺乳动物细胞一般为37℃,鸟类细胞38.5℃,昆虫细胞27℃
CO₂浓度:大多数细胞需要5%CO₂,维持培养基pH在7.2-7.4之间
湿度:培养箱湿度保持在70%-80%,避免培养基蒸发过快
原代细胞实验注意事项:

取材要快、要新鲜、全程无菌
组织离体时间越短越好,冰上操作,减少缺血损伤。
严格控制细胞代数
原代细胞只建议用 P0~P3,代数越高越容易分化、结果越不可靠。
接种密度宁高不低
原代细胞普遍怕稀,太稀不贴壁、不生长、容易凋亡。
消化是关键,宁轻勿重
胰酶 / 胶原酶只消化到细胞变圆就终止,过度消化必死一批。
吹打轻柔,避免机械损伤。
培养基和血清不要随便换批次
血清、基础培养基、添加因子固定厂家固定批次,换批次必须先预实验。
避免频繁折腾细胞
少开培养箱门,不反复观察、不反复拿进拿出,温度、pH 波动对原代杀伤极大。
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关键字: 大鼠肺微血管内皮细胞;内皮细胞样; 贴壁;
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