大鼠睾丸支持细胞

细胞简介：

大鼠睾丸支持细胞分离自睾丸；睾丸支持细胞又称Sertoli细胞，在体内呈不规则的高锥体形，细胞基部附着在基膜上，顶部伸至曲精小管腔面。它是生精细胞的支架，为其提供必需的营养物质，能合成与分泌雄激素结合蛋白，为其提供高浓度的雄激素环境等，还具有构成血-睾屏障，形成睾丸内微环境，调节精子发生等功能。睾丸支持细胞是睾丸的主要组成细胞，能分泌多种生长因子和免疫抑制因子，不仅可为精子提供营养支持和免疫保护，也能对其他细胞，如胰岛和神经细胞提供营养支持，而且当其与胰岛或神经细胞共移植时，也能够为这些细胞提供免疫保护，提高植活率。因此，睾丸支持细胞在细胞移植中具有广泛的应用前景。制备高活率的Sertoli不仅对Sertoli的基础研究有重要价值，而且在精子发生等领域有重要意义。

产品信息：

方法简介：实验室分离的大鼠睾丸支持细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的大鼠睾丸支持细胞经Fas-L免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：大鼠睾丸支持细胞

组织来源：睾丸组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠睾丸支持细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞分离：

组织样本处理：取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中，避免样本干燥和温度变化；修剪时去除坏死、结缔组织等杂质，尽量减小组织块体积以提高消化效率。

消化方法选择：

酶消化法：根据组织类型选对应酶（如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织），严格控制消化温度（通常37℃）和时间，每隔5-10分钟镜下观察，避免过度消化损伤细胞。

机械分离法：适合柔软组织（如脑、肝脏），通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞，操作时动作轻柔，减少细胞机械损伤。

细胞过滤与离心：用合适孔径的细胞筛（如100-200目）过滤细胞悬液，去除未消化的组织块；离心转速通常为1000-1500rpm，时间5-10分钟，避免高速离心导致细胞破裂。
细胞消化与传代：

方法一：利多卡因消化法

吸出培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞1次

添加1ml 12mM利多卡因消化液，轻轻转动培养瓶使液体覆盖瓶底，37℃温浴3-5分钟

显微镜下观察到细胞回缩变圆后，加入5ml完全培养基稀释消化液

轻轻吹打混匀细胞，1200rpm离心5分钟，弃上清后用完全培养基重悬接种

方法二：胰酶消化法

若利多卡因消化效果不佳，可更换为0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，重复上述操作，消化时间控制在1-2分钟

方法三：细胞刮取法

若细胞仍无法消化，加入3ml完全培养基终止消化，用无菌细胞刮轻轻刮取细胞（此方法易造成细胞机械损伤，不推荐）

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