产品介绍
AAT Bioquest生产的AATOM 633 NHS酯是胺反应性染料,用于标记氨基。是一种亮红色荧光染料,与底物结合后,AATOM 633 变成阳离子,携带 +1 的净正电荷。这些特性使 AATOM 633 特别适合高精度应用,包括单分子检测和超分辨率显微镜技术,例如 PALM、dSTORM 和 STED。此外,它还与流式细胞术 (FACS)、荧光原位杂交 (FISH) 和各种其他生物检测兼容。
染色样本分析
溶液配制
原液溶液配制:
1.蛋白质原液(溶液A)
将 100 µL 反应缓冲液(例如,pH ~9.0 的 1 M 碳酸钠溶液或 1 M 磷酸盐缓冲液)与 900 µL 目标蛋白溶液(例如,抗体、蛋白浓度 > 2 mg/mL(如果可能))混合,得到1 mL 蛋白质标记储备液。
注:蛋白质溶液(溶液 A)的 pH 应为 8.5 ± 0.5。如果蛋白质溶液的 pH 值低于 8.0,请使用 1 M 碳酸氢钠溶液或 1 M pH 9.0 磷酸盐缓冲液将 pH 值调节至 8.0-9.0 范围。
注意:蛋白质应溶解在 1X 磷酸盐缓冲盐水 (PBS)(pH 7.2-7.4)中。如果蛋白质溶解在 Tris 或甘氨酸缓冲液中,则必须用 1X PBS(pH 7.2-7.4)进行透析,以去除广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和醋酸铵)。
注意:不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白(BSA)抗体或明胶不会被很好的标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得标记结果。
注意:如果蛋白质浓度低于 2 mg/mL,结合效率会明显降低。为了获得最佳标记效率,建议最终蛋白质浓度范围为 2-10 mg/mL。
2.AATOM 620 NHS酯原液(溶液 B)
将无水 DMSO 添加到 AATOM 620 NHS 酯小瓶中,制成 10 mM 原液。通过移液或涡旋充分混合。
注意:在开始缀合之前准备染料储备溶液(溶液 B)。及时使用。延长储存染料原液可能会降低染料活性。溶液 B 在避光、防潮的情况下可在冰箱中保存两周。避免冻融循环。
西安百萤生物科技有限公司是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒的技术企业;主要以荧光探针,分子探针,核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心,产品广泛应用于基因合成、细胞检测、活体示踪,抗体标记、新药筛选等领域。
关键字: AAT Bioquest;蛋白质;
西安百萤生物科技有限公司是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒的高新技术企业;主要以荧光探针,分子探针,核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心,产品广泛应用于基因合成、细胞检测、活体示踪,抗体标记、新药筛选等领域。