人脐静脉平滑肌细胞

人脐静脉平滑肌细胞

产品信息：

产品名称 人脐静脉平滑肌细胞

组织来源 脐带组织
种属 人

产品规格 5×10^5Cells/T25

培养信息：

方法简介：实验室分离的人脐静脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人脐静脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：人脐静脉平滑肌细胞

组织来源：脐带组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液：0.25%胰蛋白酶人脐静脉平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 ：

人脐静脉平滑肌细胞分离自脐带组织；它是脐静脉的重要结构组成细胞之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构，脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉，卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中，子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管，与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近，在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2，代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘，脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。血管平滑肌是许多重大血管疾病的细胞基础；血管平滑肌细胞的异常增加的生长潜力在血管疾病发生过程中起决定作用。由于脐带是分娩过程中的废弃物，同时从脐带中分离人脐静脉平滑肌细胞方法相对成熟，使得体外培养的脐静脉平滑肌细胞作为研究血管的模型细胞。脐静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态：大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
原代细胞接种：

细胞计数与密度调整

使用血球计数板或细胞计数仪准确计数，调整细胞密度至合适范围（不同细胞类型差异较大，一般为1×10⁵-1×10⁶cells/ml）

密度过低：细胞无法分泌足够的生长因子，难以存活；密度过高：细胞竞争营养物质，易出现接触抑制

培养基选择

优先使用原代细胞专用培养基，若使用通用培养基，需添加合适的生长因子、血清等补充成分（如成纤维细胞添加FGF，内皮细胞添加VEGF）

血清浓度：原代细胞培养血清浓度一般为10%-20%，部分特殊细胞（如神经细胞）需使用无血清培养基

培养环境控制

温度：哺乳动物细胞一般为37℃，鸟类细胞38.5℃，昆虫细胞27℃

CO₂浓度：大多数细胞需要5%CO₂，维持培养基pH在7.2-7.4之间

湿度：培养箱湿度保持在70%-80%，避免培养基蒸发过快
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原代细胞实验注意事项：

取材要快、要新鲜、全程无菌

组织离体时间越短越好，冰上操作，减少缺血损伤。

严格控制细胞代数

原代细胞只建议用 P0～P3，代数越高越容易分化、结果越不可靠。

接种密度宁高不低

原代细胞普遍怕稀，太稀不贴壁、不生长、容易凋亡。

消化是关键，宁轻勿重

胰酶 / 胶原酶只消化到细胞变圆就终止，过度消化必死一批。

吹打轻柔，避免机械损伤。

培养基和血清不要随便换批次

血清、基础培养基、添加因子固定厂家固定批次，换批次必须先预实验。

避免频繁折腾细胞

少开培养箱门，不反复观察、不反复拿进拿出，温度、pH 波动对原代杀伤极大。