人乳腺上皮细胞

人乳腺上皮细胞

产品信息：

产品名称 人乳腺上皮细胞

组织来源 乳腺组织
种属 人

产品规格 5×10^5Cells/T25

培养信息：

方法简介：实验室分离的人乳腺上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：实验室分离的人乳腺上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

产品名称：人乳腺上皮细胞

组织来源：乳腺组织

产品规格：5×10⁵Cells/T25培养瓶

培养信息：包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率:每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%胰蛋白酶人乳腺上皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 ：

人乳腺上皮细胞分离自乳腺组织；乳腺是复管泡状皮肤腺，主要由腺上皮细胞组成，并具有特殊的泌乳功能。在妊娠期，导管末梢发育成腺泡；近年来的许多研究都表明乳腺癌、乳腺炎等的发生都与乳腺上皮细胞(MEC)有密切联系，体外分离培养MECs即成为研究开展的关键步骤。乳腺是乳房的腺体组织，乳腺由导管和腺泡组成，腺泡是分泌乳汁的重要部分。乳腺的正常发育是由体内激素和局部合成的生长因子共同调控，其中乳腺表达的生长因子对乳腺上皮细胞的增殖、分化、凋亡产生极大的影响。乳腺上皮细胞分离自分娩后3-5天的乳腺组织，为贴壁生长型细胞，呈多角形、圆形以及短梭形；乳腺上皮细胞主要功能即生乳功能。
细胞培养方法：

1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
公司正在出售的产品：

原代细胞纯化与鉴定：

纯化方法：

差速贴壁法：利用不同细胞贴壁速度差异，如成纤维细胞贴壁快，上皮细胞贴壁慢，在接种后1-2小时移除未贴壁细胞，可初步分离不同细胞类型。

免疫磁珠分选法/流式细胞术：针对特定细胞表面标志物，利用特异性抗体标记细胞，通过磁珠或流式分选仪分离目标细胞，纯度可达90%以上。

鉴定手段：通过形态学观察（原代细胞形态多样，与传代细胞有差异）、免疫细胞化学染色、RT-PCR检测特异性基因表达等方法，确认目标细胞的纯度和身份。