产品介绍:
检测原理与目的
检测原理:试剂盒利用针对CP4-EPSPS基因设计的特异性引物,在恒温条件下(通常为60-65℃)对目标核酸进行扩增。反应体系中包含荧光染料,扩增过程中产生的焦磷酸镁沉淀会与荧光染料结合,发出荧光信号。仪器实时监测荧光信号的变化,并根据预设的阈值自动判读结果(阳性或阴性)。
产品名称 | CP4-EPSPS基因核酸检测试剂盒(恒温荧光法) | 货号 | AP3386 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 48T |
核心目的:用于食品、饲料、农作物植株等样品中CP4-EPSPS基因的快速定性检测。广泛应用于海关检疫、食品安全监管、农业转基因生物安全评价等领域。
�� 产品核心参数与组成
项目 详细信息
检测方法 恒温荧光法 (LAMP/RPA)
检测靶标 CP4-EPSPS基因 (5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶)
产品规格 48T (即48次测试)
检测限 通常为 0.1% (部分高灵敏度试剂盒可达更低拷贝数)
主要组分 反应液 (含引物、dNTPs、缓冲液)、酶液 (含Bst DNA聚合酶等)、
阳性质控品 (含CP4-EPSPS基因片段)、阴性质控品 (无菌水)
��️ 操作流程
该试剂盒的操作流程相对简化,主要分为以下几个步骤:
样品处理:提取待测样品的基因组DNA(通常使用配套的植物基因组DNA提取试剂盒)。
试剂准备:在冰上将反应液和酶液按比例混合,涡旋混匀后离心备用。
加样:将提取的DNA模板、阴性对照、阳性对照分别加入到分装好的反应管中。
恒温扩增:将反应管放入恒温荧光检测仪中,在 63℃ (具体温度依说明书而定) 条件下反应 60分钟。
结果判读:仪器自动根据荧光曲线和阈值线判断结果(阳性或阴性)。
�� 结果判读标准
恒温荧光法的结果判读主要依据荧光扩增曲线和Ct值:
结果类型 判读标准 解释
阳性 (+) 荧光扩增曲线呈典型的“S”型,且 Ct值 < 36-40 (依说明书阈值而定)。 样品中检测到CP4-EPSPS基因片段,判定为转基因阳性。
阴性 (-) 无Ct值,或Ct值 ≥ 阈值,曲线为直线或轻微斜线,无“S”型扩增曲线。 样品中未检测到CP4-EPSPS基因片段,判定为阴性。
无效 阳性对照未出现“S”型曲线,或阴性对照出现扩增曲线。 试验结果无效,需排查污染或试剂失效问题后重新检测。
⚠️ 注意事项
防止污染:由于灵敏度极高,建议实验分区操作(试剂准备区、样本制备区、扩增区),避免气溶胶污染导致假阳性。
避光保存:反应液中的成分对光敏感,试剂应避光保存,使用前避免长时间暴露在强光下。
仪器兼容性:适用于各类恒温荧光检测仪(如Genie系列、ESE Tube Scanner等),部分荧光定量PCR仪也可通过调整程序使用。
对照设置:每次检测必须包含阴性对照(无菌水)和阳性对照(含CP4-EPSPS序列的质粒或阳性DNA),以确保试验有效性。
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应用场景与产品选择建议
科研领域:
常规PCR试剂盒。
临床诊断:
探针法qPCR试剂盒(如牛白血病病毒,灵敏度100拷贝/反应)。
现场检测:
恒温扩增试剂盒(如LAMP法,90分钟出结果)
关键字: CP4-EPSPS;基因 ;核酸检测试剂盒;恒温荧光法;
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