人输尿管上皮细胞
产品信息:
产品名称 人输尿管上皮细胞
组织来源 尿道组织
种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Human Ureteral Epithelial Cells | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 上皮细胞样 | 货号 | P-X1332 |
培养信息:
方法简介:实验室分离的人输尿管上皮细胞采用先中性蛋白酶消化、然后机械分离法使输尿管分层、最后胶原酶消化,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:实验室分离的人输尿管上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称:人输尿管上皮细胞
组织来源:尿道组织
产品规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶
培养信息:包被条件鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
传代特性:可传2-3代
消化液:0.25%胰蛋白酶人输尿管上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞简介 :
人输尿管上皮细胞分离自输尿管组织;输尿管上接肾盂,下连膀胱,是一对细长的管道,呈扁圆柱状,位于腹膜后,为一肌肉粘膜所组成管状结构,沿腰大肌内侧的前方垂直下降进入骨盆。输尿管有三个狭窄部:一个在肾盂与输尿管移行处(输尿管起始处);一个在越过小骨盆入口处;最后一个在进入膀胱壁的内部。这些狭窄是结石、血块及坏死组织容易停留的部位。输尿管——膀胱连接处有一种特殊结构,即瓦耳代尔鞘,它能有效地防止膀胱内尿液返流到输尿管。临床上将输尿管分为上、中、下三段,也可称为腹段、盆段、膀胱段。其中,腹段自肾盂输尿管交界处,到跨越髂动脉处;盆段,自髂动脉到膀胱壁;膀胱段,自膀胱壁内斜行至膀胱粘膜、输尿管开口。输尿管管壁分为4层,黏膜层、固有层、肌层、外膜。黏膜层表面为移行上皮,约有4-5层细胞;固有层由细密的结缔组织构成,内含胶原纤维和少量弹性纤维;输尿管肌层主要由内纵和外环两层平滑肌组成;外膜为疏松结缔组织,营养血管由外膜进入输尿管。其中,输尿管上皮细胞主要分布于黏膜层。
原代细胞培养:
培养基选择:根据细胞类型选择专用培养基,如上皮细胞用上皮细胞培养基、成纤维细胞用成纤维细胞培养基,必要时添加血清(胎牛血清FBS常用,浓度10%-20%)、生长因子、抗生素等补充成分;培养基使用前需预热至37℃。
接种密度控制:原代细胞接种密度不宜过低,否则细胞难以分泌足够的自分泌因子支持生长,一般接种密度为1×10⁵-5×10⁵细胞/cm²;接种后轻轻晃动培养瓶,使细胞均匀分布。
培养环境监控:保持培养箱内37℃、5%CO₂的恒定环境,定期检查培养基颜色变化(变黄说明pH下降,需及时换液);原代细胞贴壁前避免频繁晃动培养瓶,贴壁后通常每2-3天换液一次。
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原代细胞分离:
组织样本处理:取材后立即置于预冷的含抗生素的PBS或组织保存液中,避免样本干燥和温度变化;修剪时去除坏死、结缔组织等杂质,尽量减小组织块体积以提高消化效率。
消化方法选择:
酶消化法:根据组织类型选对应酶(如胰蛋白酶用于上皮类组织、胶原酶用于结缔组织丰富的组织),严格控制消化温度(通常37℃)和时间,每隔5-10分钟镜下观察,避免过度消化损伤细胞。
机械分离法:适合柔软组织(如脑、肝脏),通过剪碎、吹打、过滤等方式分散细胞,操作时动作轻柔,减少细胞机械损伤。
细胞过滤与离心:用合适孔径的细胞筛(如100-200目)过滤细胞悬液,去除未消化的组织块;离心转速通常为1000-1500rpm,时间5-10分钟,避免高速离心导致细胞破裂。
关键字: 人输尿管上皮细胞;上皮细胞样;贴壁;
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