重组表达原理:
基因克隆:从牛基因组中获取CST3基因的编码序列(对应氨基酸31–148),插入含有启动子、筛选标记和His标签序列的质粒载体。
宿主表达:将重组质粒转化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG诱导下启动蛋白表达。该系统成本低、表达效率高,适合大规模生产。
蛋白纯化:利用His标签与镍柱亲和层析结合,实现高纯度(>95%)蛋白回收,再经透析或凝胶过滤去除杂质。
冻干保存:加入海藻糖作为保护剂,冻干后可长期稳定储存,复溶后保持天然构象和生物活性。
产品概述:
Recombinant Human DNA Polymerase lambda (POLL) 是一种通过基因重组技术在体外表达和纯化的关键DNA修复酶。作为X家族DNA聚合酶的重要成员,它在维持基因组稳定性和应对DNA损伤中扮演着核心角色,特别是在非同源末端连接(NHEJ)修复途径中不可或缺。
产品名称; Recombinant Human DNA Polymerase lambda
别名; BETA N, BETAN, DNA directed DNA polymerase lambda, DNA polymerase beta 2, DNA polymerase beta-2, DNA polymerase kappa, DNA polymerase kappa DNA polymerase beta N, DNA polymerase lambda, DNA polymerase lamda2, DPOLL_HUMAN, EC 2.7.7.7,EC 4.2.99., FLJ46002, OTTHUMP00000020321, OTTHUMP00000020323, OTTHUMP00000059179, Pol beta2, POL KAPPA, Pol Lambda, POLKAPPA, POLL, Polymerase DNA directed lambda
宿主; E.Coli
表达区间; 1-300
分子量; 32.9 kDa
标签; N-terminal His Tag
纯度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
应用; Western Blot, ELISA
性状; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存储; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前准备:
离心处理
冻干粉在运输过程中可能附着于管壁或管盖,开盖前应先进行离心,确保粉末沉降至管底。
建议条件:3000–3500 rpm 离心 5 分钟
若无高速离心机,可适当延长低速离心时间
平衡温度
将冻干粉缓慢恢复至室温(避免加热加速溶解),防止因温差导致管内冷凝水影响蛋白稳定性
溶解(Reconstitution)
溶解液选择
推荐使用无菌蒸馏水或 PBS(pH 7.4)进行复溶
若用于细胞实验,可选用含 0.1% BSA 的缓冲液以增强稳定性
配制浓度
将冻干粉溶解至终浓度 0.1–1.0 mg/mL,此范围适用于大多数实验场景
浓度过高可能导致蛋白聚集,过低则易失活
混匀方式
使用移液枪头轻轻吹打数次,或上下轻柔颠倒混匀
严禁使用涡旋振荡器,以免破坏蛋白空间结构,导致活性丧失
公司正在出售的产品:
过量位点蛋白4抗体 | Pacific Blue标记小鼠NK1.1单克隆抗体 |
自噬相关蛋白13抗体 | APC标记人CD3单克隆抗体 |
髓鞘相关糖蛋白(CD57)抗体 | 组织总酶连续循环比色法定量检测试剂盒 |
磷酸化钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶4抗体 | 细胞蛋白表达荧光定量检测试剂盒-LEPTIN |
细胞对氧磷酶3(PON3)活性比色法定量检测试剂盒 | 蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
组织ITK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) | 组织一氧化氮合成酶总活性酶动力比色法定量检测试剂盒 |
虫卵细胞活力和死亡细胞流式定量检测试剂盒 | 白介素-17抗体 |
DMDC处理试剂盒 | LSM12蛋白抗体 |
植物叶片高质纯化叶绿体分离试剂盒 | FITC标记人CD62L单克隆抗体 |
蛋白样品赖层析法去内毒素试剂盒 | 卵巢癌相关基因1抗体 |
细菌脯肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量检测试剂盒 | 代谢型谷氨酸受体-3抗体 |
细胞RyR受体蛋白表达比色法定量检测试剂盒 | Recombinant Human DNA Polymerase lambda载脂蛋白AI调节蛋白1抗体 |
碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体 | AF488标记人CD158e1单克隆抗体 |
注意事项:
安全提示:仅限研究使用,避免接触临床样本;操作时需佩戴防护装备。
质量控制:产品纯度通过SDS-PAGE验证,确保生物活性稳定;避免使用含硫柳汞等有毒物质的试剂。
兼容性:适用于多种实验体系,但需优化浓度以避免非特异性结合。
关键字: DNA Polymerase lambd;32.9 kDa; 1-300;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物专注于实验室和公共卫生领域,利用互联网、数据分析及自动化技术,包括实验室固定资产、仪器设备、生物样本、化学品、试剂、配件耗材、环境、仪器自动化和高通量筛选等一体化综合管理平台。不断为各行业实验室细胞生命学产品、技术服务、免疫学和分子学产品,截止至2024年5月,西格生物已为生命科学、检验检测、化工材料、科研院所、政府机构多行业300余家知名客户提供实验室完整解决方案。本着帮助用户实现“让科研场所更智能、让科研人员更专注、让科学服务更高效“的愿景,西格生物将继续在实验室科研产品领域持续发力,更加重视本土化,建构通用性高、适应性好、模块搭配灵活,能快速响应客户需求的产品。