大鼠大隐静脉内皮细胞 新品

大鼠大隐静脉内皮细胞

细胞简介 ：

大鼠大隐静脉内皮分离自大隐静脉；大隐静脉起于足背静脉弓内侧端，经内踝前方，沿小腿内侧缘伴隐神经上行，经股骨内侧髁后方，进入大腿内侧部，与股内侧皮神经伴行，逐渐向前上，在耻骨结节外下方穿隐静脉裂孔，汇入股静脉，其汇入点称为隐股点。有5条属支：旋髂浅静脉、腹壁浅静脉、外静脉、股内侧浅静脉和股外侧浅静脉，它们汇入大隐静脉的形式多样，相互间吻合丰富。大隐静脉曲张行高位结扎时，须分别结扎、切断各属支，以防复发。大隐静脉内皮细胞对维持大隐静脉动态平衡起着重要作用。它们合成、分泌凝血和纤溶系统的激活因子和抑制因子、影响血小板粘附和聚集的调节因子；大隐静脉内皮细胞还释放控制细胞增殖和调节血管壁紧张度的分子。

产品信息：

产品名称 大鼠大隐静脉内皮细胞

英文名称 Rat Great Saphenous Vein Endothelial Cells

组织来源 大隐静脉组织

默认种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠大隐静脉内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

方法简介 公司实验室分离的大鼠大隐静脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测 公司实验室分离的大鼠大隐静脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养操作方法：

核心特点

高度生理相关性：保留了体内来源组织的结构、功能和基因表达特征。

有限寿命：与无限增殖的肿瘤细胞系不同，原代细胞增殖能力有限，经过一定次数的分裂后会进入衰老期，这更符合正常细胞的生理状态。

异质性：初始培养物通常是多种细胞类型的混合物，有时需要通过差速贴壁等方法进行纯化。

操作要求高：对培养环境、试剂质量和无菌操作的要求极为严格，培养难度大于永生化细胞系。

组织块培养法

取材与剪切

在无菌条件下取出组织，用Hanks液或PBS清洗，去除血污和脂肪、结缔组织等非目标成分。

用眼科剪将组织剪切成 0.5-1 mm3 的小块。

接种

用吸管将组织块均匀地贴附在培养皿或培养瓶的内表面，各组织块之间保持一定间距（约0.5 cm）。

吸去多余液体，将培养器皿翻转，放入 37℃、5% CO 的培养箱中，静置 1-3小时，让组织块牢固贴壁。

加液培养

待组织块贴壁后，轻轻翻转培养瓶，从一侧缓慢加入足量的培养液，使组织块浸没在液体中，注意不要让液体直接冲击组织块，以免冲起。

继续在培养箱中静置培养。通常 3-5天 后可观察到细胞从组织块边缘长出。

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成功的原代培养依赖于严谨的细节控制：

严格无菌操作：这是实验成功的基石。所有操作需在生物安全柜中进行，试剂和耗材必须无菌。

保持静置：细胞接种后的最初24-48小时内，应保持培养瓶绝对静置，避免频繁取出观察或晃动，这有助于细胞贴壁和伸展。

优化消化过程：

消化时间要恰到好处，过长会损伤细胞，过短则细胞分散不佳。

胶原酶对组织的损伤较小，常用于分离活性要求高的细胞；胰蛋白酶作用较强，需严格控制时间。

酶液应新鲜配制，避免活性下降。

控制接种密度：原代细胞在低密度下不易存活，建议适当提高初始接种密度，以保证细胞间的相互作用促进其生长。

定期换液：根据培养基颜色变化（如变黄）或每隔2-3天更换一次培养液，以清除代谢废物并补充营养。