产品介绍:

H5 亚型流感病毒核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测 H5 亚型流感病毒(如 H5N1、H5N6 等)核酸的诊断工具。该试剂盒主要针对 H5 亚型流感病毒的血凝素(HA)基因保守区域设计,利用实时荧光 PCR 技术,对临床样本或环境样本中是否存在 H5 亚型流感病毒进行特异性筛查和鉴定。
产品名称 | H5 亚型流感病毒核酸检测试剂盒 | 货号 | AP3037 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
�� 试剂盒核心原理

该试剂盒通常基于 TaqMan 荧光探针法(实时荧光定量 RT-PCR)原理:
反转录(RT):试剂盒中含有反转录酶,能将样本中的病毒 RNA 逆转录为互补 DNA(cDNA)。
PCR 扩增:针对 H5 亚型流感病毒的 HA 基因保守区域设计特异性引物和 TaqMan 探针。在 PCR 反应过程中,引物和探针会特异性结合到目标 cDNA 上。
荧光检测:在扩增过程中,探针会被 Taq 酶降解,释放出荧光基团。仪器实时监测荧光信号的累积。
结果判定:若样本中存在 H5 亚型流感病毒核酸,荧光信号会随循环数增加而指数级增长,当信号强度超过设定阈值(Ct 值)时,判定为阳性;反之则为阴性。
�� 典型产品参数

参数项 典型指标/说明
通用名称 H5 亚型流感病毒核酸检测试剂盒(荧光 PCR 法)
检测靶标 H5 亚型流感病毒 HA 基因
检测方法 一步法实时荧光 RT-PCR (Real-Time RT-PCR)
产品规格 20T/盒、25T/盒 或 50T/盒
最低检测限 通常为 10³ 拷贝/mL 或 0.04 TCID₅₀
样本类型 咽拭子、鼻拭子、痰液、肺泡灌洗液、禽类泄殖腔拭子等
适用仪器 ABI 7500、LightCycler 480、Roche 480 等荧光 PCR 仪
储存条件 -20℃ ± 5℃ 避光保存
组成成分(以常见配置为例)

PCR 反应液:包含 PCR 缓冲液、dNTPs、Mg²⁺。
酶混合物:包含反转录酶和 DNA 聚合酶(通常为 Taq 酶)。
引物与探针:针对 H5 亚型流感病毒 HA 基因特异性片段的特异性引物和荧光标记探针。
阳性对照:含有目的基因片段的质粒或灭活病毒,用于验证试剂盒有效性。
阴性对照:无核酸酶水或缓冲液,用于监控污染情况。
内标(部分试剂盒包含):用于监控提取和扩增过程是否正常,防止假阴性。
�� 结果判读标准
阳性(+):
样本孔扩增曲线呈典型 S 型,且 Ct 值 ≤ 40(具体阈值视说明书而定)。
提示样本中检测到 H5 亚型流感病毒核酸。
阴性(-):
无扩增曲线,或 Ct 值 > 40(或显示为 Undetermined)。
提示样本中未检测到 H5 亚型流感病毒核酸(或低于检测限)。
无效:
阳性对照未检出,或阴性对照出现扩增,提示实验失败或存在污染,需重做。
⚠️ 注意事项与局限性

假阴性风险:如果样本采集时间过晚(发病超过 7 天)、采样部位不当或样本运输保存不当(反复冻融或未冷链),可能导致病毒 RNA 降解,出现假阴性。
生物安全:H5 亚型流感病毒(特别是 H5N1)属于高致病性禽流感病毒,样本的采集、运输和处理必须在符合生物安全二级(BSL-2)或更高级别的实验室中进行,并采取严格的个人防护措施。
临床诊断:核酸检测结果仅为临床诊断提供参考依据,不能作为唯一确诊标准。确诊需结合流行病学史、临床症状及其他实验室检查(如病毒分离、血清学抗体检测)综合判断。
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主要应用:

转基因作物检测:快速筛查Bt棉花、Bt玉米等
食品/饲料监管:标识转基因成分是否符合法规(如中国GB 2760、欧盟EC 1829/2003)
环境监测:土壤或农产品中Bt基因残留分析
操作流程
样本处理:研磨植物组织或均质化食品样本
DNA提取:推荐CTAB法或商业化提取试剂盒
PCR扩增:
反应体系:20 μL(含15 μL反应液+5 μL DNA模板)
扩增程序:95℃ 2min → (95℃ 15s → 60℃ 30s)×40循环
关键字: H5 ;亚型流感病毒;检测试剂盒;
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