产品介绍:
副流感病毒Ⅰ型核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测样本中副流感病毒Ⅰ型(Human Parainfluenza Virus Type 1, HPIV-1)核酸的分子诊断工具。该试剂盒主要基于实时荧光 RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)技术,能够特异性识别副流感病毒Ⅰ型的基因组。
产品名称 | 副流感病毒Ⅰ型核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3059 |
检测原理
该试剂盒的核心原理是实时荧光 RT-PCR:
逆转录 (RT): 将样本中提取的病毒 RNA 逆转录成互补的 DNA (cDNA)。
PCR 扩增: 利用针对副流感病毒Ⅰ型基因组高度保守区设计的特异性引物和荧光标记的探针(通常为 TaqMan 探针)进行扩增。
信号检测: 在扩增过程中,随着目的基因片段的指数级增加,荧光信号也随之增强。仪器实时监测荧光信号,从而判断样本中是否存在副流感病毒Ⅰ型核酸。
�� 典型性能参数
参数指标 典型数值/范围 说明
检测目标 副流感病毒Ⅰ型 (HPIV-1) 特异性识别 HPIV-1 核酸
检测方法 荧光 RT-PCR (探针法) 即开即用,特异性高
检测限 1×10³ 拷贝/mL 最低可检测浓度
检测范围 1×10³ ~ 1×10⁹ 拷贝/mL 具有良好的线性关系
特异性 高 不与副流感病毒Ⅱ、Ⅲ型、流感病毒、腺病毒等其他呼吸道病原体交叉反应
检测时间 约 1.5 - 2 小时 视 PCR 仪程序而定
�� 样本类型
咽拭子: 包括口咽拭子和鼻咽拭子,是最常见的上呼吸道样本。
痰液: 适用于下呼吸道感染的检测。
肺泡灌洗液 (BALF): 用于重症患者或下呼吸道感染的精准诊断。
鼻咽抽吸物: 常用于儿童患者。
�� 操作流程简述
样本采集与保存: 使用无菌采样拭子采集样本,置于病毒保存液中,4℃保存并尽快送检;长期保存需置于 -70℃。
病毒 RNA 提取: 使用配套的病毒 RNA 提取试剂盒(如磁珠法或柱提法)提取核酸。
配置反应体系: 将提取的 RNA、PCR 反应液(含引物、探针、酶)按比例混合。
上机检测: 将反应管放入实时荧光 PCR 仪(如 ABI 7500、LightCycler 480 等),设置好荧光通道(通常为 FAM)。
结果分析: 根据扩增曲线的 Ct 值(通常阈值设为 35-40)进行判读。
⚠️ 注意事项
生物安全: 所有样本均视为具有潜在传染性,操作应在生物安全二级(BSL-2)实验室进行,穿戴适当的个人防护装备(口罩、手套、防护服)。
防污染: PCR 检测极其灵敏,必须严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、PCR 扩增区),防止扩增产物气溶胶污染导致假阳性。
试剂保存: 试剂盒中的酶和探针通常需在 -20℃ 避光保存,避免反复冻融。
临床意义: 副流感病毒Ⅰ型是引起儿童呼吸道感染(尤其是哮吼/喉气管支气管炎)的重要病原体。该试剂盒主要用于呼吸道感染的鉴别诊断,帮助临床医生区分流感病毒、新冠病毒和副流感病毒的感染,从而指导精准治疗。检测结果需结合流行病学史和临床症状综合判断。
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注意事项:
1、严防污染
分区操作:必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样,避免气溶胶交叉污染。
专用耗材:使用无核酸酶的枪头、EP管等,建议使用带滤芯枪头。
规范操作:加样后立即盖紧管盖,避免试剂外溅。
2、保证质量
样本处理:样本采集后应立即冷藏(2-8℃),长期保存需置于-70℃以下,避免反复冻融。
试剂保存:严格按照说明书要求的温度(通常是-20℃或2-8℃)保存试剂,避免反复冻融。
对照设置:每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照,监控实验有效性。
3、注意安全
生物安全:阳性样本需按生物安全三级标准处理,实验人员需佩戴个人防护装备(PPE)。
废弃物处理:所有废弃物(包括耗材、样本)需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃
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