产品介绍:
肠道病毒 71 型(EV71)核酸检测试剂盒是一种专门用于检测样本中是否存在肠道病毒 71 型(Enterovirus 71, EV71)的分子诊断工具。
EV71 是引起手足口病的主要病原体之一,尤其与重症病例(如脑炎、肺水肿、无菌性脑膜炎)密切相关。因此,该试剂盒在临床早期诊断、病情评估和流行病学监控中具有极高的价值。
产品名称 | 肠道病毒 71 型核酸检测试剂盒 |
产品分类 | 荧光PCR |
规格 | 50T |
货号 | AP3172 |
以下是关于该试剂盒的详细介绍:
�� 检测原理
该试剂盒通常基于实时荧光定量 RT-PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)技术。
核心机制: 由于 EV71 是一种 RNA 病毒,检测过程分为两步:
逆转录(RT): 将样本中的病毒 RNA 逆转录为互补 DNA(cDNA)。
PCR 扩增: 利用特异性引物和荧光探针(通常针对 VP1 基因或 5' 非编码区的保守序列)对 cDNA 进行扩增。
检测方式: 在 PCR 反应体系中加入荧光标记的探针(如 TaqMan 探针)。如果样本中含有 EV71 病毒,在扩增过程中会产生荧光信号,仪器会实时监测并记录。根据Ct 值(循环阈值)来判断样本是否为阳性。
�� 主要特点与性能
特性 描述
高特异性 专门识别 EV71,不与柯萨奇病毒 A16(Cox A16)、脊髓灰质炎病毒等其他肠道病毒发生交叉反应。
高灵敏度 最低检测限通常可达 10³ Copies/mL 或 100-500 拷贝/mL,能有效检出微量病毒。
快速诊断 全程检测时间约 2-4 小时(含核酸提取),远快于传统的病毒培养法(需数天)。
定性/定量 大多为定性检测(判断有无感染),部分高端试剂盒可进行定量分析(评估病毒载量)。
�� 临床应用与意义
手足口病的辅助诊断: 用于区分 EV71 感染与其他原因(如柯萨奇病毒)引起的手足口病或疱疹性咽峡炎。
重症预警: EV71 感染容易导致重症和神经系统并发症。早期检出 EV71 阳性,有助于医生密切监测病情,及时干预,降低死亡率。
流行病学监测: 在手足口病高发季节,用于监测 EV71 的流行趋势和毒株变异。
适用样本类型
该试剂盒可检测多种临床样本,不同样本的采集要求如下:
咽拭子: 采集发病 3 天内的咽后壁及扁桃体分泌物(避免触及舌头)。
粪便/肛拭子: 采集发病 7 天内的粪便样本。
疱疹液: 用消毒针挑破疱疹,用棉签蘸取液体。
脑脊液: 适用于出现神经系统症状的患者。
血清/血浆: 用于抗体检测或病毒载量分析(部分试剂盒适用)。
�� 结果判读(参考通用标准)
阳性(+): 扩增曲线呈典型的 S 型,且 Ct 值 ≤ 35~38(具体阈值视不同厂家说明书而定)。提示样本中存在 EV71 病毒核酸。
阴性(-): 无扩增曲线,或 Ct 值 > 35~38。提示未检测到 EV71 病毒核酸,或病毒含量低于检测限。
⚠️ 注意事项
采样时机: 发病初期(前 3-5 天)病毒载量最高,检出率最准确。
样本保存: 短期保存可置于 2-8℃,长期保存需置于 -70℃,避免反复冻融导致 RNA 降解。
辅助诊断: 检测结果仅供参考,临床诊断需结合患者的流行病学史、临床症状、体征及其他检查结果综合判断。
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注意事项:
1、严防污染
分区操作:必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样,避免气溶胶交叉污染。
专用耗材:使用无核酸酶的枪头、EP管等,建议使用带滤芯枪头。
规范操作:加样后立即盖紧管盖,避免试剂外溅。
2、保证质量
样本处理:样本采集后应立即冷藏(2-8℃),长期保存需置于-70℃以下,避免反复冻融。
试剂保存:严格按照说明书要求的温度(通常是-20℃或2-8℃)保存试剂,避免反复冻融。
对照设置:每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照,监控实验有效性。
3、注意安全
生物安全:阳性样本需按生物安全三级标准处理,实验人员需佩戴个人防护装备(PPE)。
废弃物处理:所有废弃物(包括耗材、样本)需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃
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