产品介绍:

柯萨奇病毒 A5 型(Coxsackievirus A5,简称 CVA5)核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测 CVA5 病毒核酸的分子诊断工具。CVA5 是肠道病毒的重要成员,可引起手足口病、疱疹性咽峡炎等疾病,因此该试剂盒在临床诊断和流行病学监测中具有重要意义。
产品名称 | 柯萨奇病毒 A5 型核酸检测试剂盒 | 货号 | AP3178 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
检测原理与技术
目前市面上的试剂盒主要基于 实时荧光定量 RT-PCR 技术(qRT-PCR),通常采用 TaqMan 探针法。
技术原理: 由于柯萨奇病毒是 RNA 病毒,试剂盒首先利用逆转录酶将病毒 RNA 转化为 cDNA,然后通过荧光 PCR 进行扩增检测。试剂盒针对 CVA5 病毒基因组中高度保守的区域(如 VP1 基因)设计特异性的引物和探针。
反应机制: 在 PCR 扩增过程中,随着目标序列的指数级扩增,荧光探针被酶切,释放出荧光信号(通常标记为 FAM 荧光素),仪器实时监测信号变化,从而实现高特异性和高灵敏度的检测。
双重/多重检测: 市场上也有双重检测试剂盒(如“CVA2/CVA5 二重检测试剂盒”),可以同时检测并区分 CVA2 和 CVA5,提高检测效率。
�� 核心性能指标

根据已公开的专利及研究数据,该类试剂盒通常具备以下性能:
指标 参数 说明
检测靶标 VP1 基因片段 针对病毒高度保守区域设计
灵敏度 高 最低检测限可达 10² copies/mL 级别,能检出极低浓度的病毒
特异性 高 与 EV71、CVA16、CVA6 等其他肠道病毒无交叉反应
检测时间 约 1.5 ~ 2 小时 含逆转录和扩增步骤,远快于传统病毒分离培养
�� 典型操作流程

样本采集: 采集咽拭子、粪便、疱疹液或血清/血浆等临床样本。
核酸提取: 使用试剂盒配套的核酸提取试剂(通常为磁珠法)提取样本中的病毒 RNA。
反转录与扩增: 将提取的 RNA 模板加入预混好的 RT-PCR 反应液中,上机运行程序(包括逆转录、预变性及扩增循环)。
结果判读: 根据扩增曲线和 Ct 值判定结果。
阳性: FAM 通道出现典型的 S 型扩增曲线,且 Ct 值小于设定阈值(如 Ct ≤ 37)。
阴性: 无扩增曲线,或 Ct 值大于设定阈值(如 Ct > 40)。
�� 市场与应用现状

临床意义: CVA5 是手足口病和疱疹性咽峡炎的常见病原体之一。虽然 EV71 和 CVA16 是最受关注的病原,但 CVA5 等其他型别病毒的流行率也在波动,因此对其进行分型检测有助于精准诊断和流行病学分析。
科研用途: 目前部分产品主要定位于科研或疾控中心(CDC)的监测使用,具体产品需根据注册证信息确认其是否可用于临床诊断。
⚠️ 注意事项

仅限体外诊断/科研: 许多此类试剂盒明确标注为“科研实验”或“卫生监督检测”用途,严禁用于临床医疗诊断,除非其已获得国家药品监督管理局(NMPA)的医疗器械注册证。
操作规范: RNA 极易降解,操作过程中需注意防止 RNase 污染,并严格分区操作,防止扩增产物污染导致假阳性。
窗口期: 病毒载量在感染初期较高,若在病程后期采样,病毒载量可能低于检测下限,导致阴性结果。
公司正在出售的产品:

腺嘌呤受体抗体 | Beta casein β-酪蛋白抗体 |
FAM50A蛋白抗体 | 沉默调节相关蛋白6抗体 |
ZFYVE1 锌指蛋白2A亚单位1抗体 | A-RAF A-Raf 重组兔单克隆抗体 |
KIAA0323蛋白抗体 | 大鼠Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)核酸检测试剂盒 |
Chorein 液泡蛋白分选蛋白VPS13A抗体 | 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)PCR检测试剂盒 |
TMEM208 跨膜蛋白208抗体 | 大鼠再生胰岛衍生蛋白3α(REG3α)PCR检测试剂盒 |
细胞表面趋化因子受体6(CD196)抗体 | 小鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)核酸检测试剂盒 |
SLC12A6 钾氯离子转运蛋白3抗体 | 大鼠活性氧(ROS)PCR检测试剂盒 |
S1标签抗体 | 小鼠Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)核酸检测试剂盒 |
SETMAR 组蛋白赖氨酸N-甲基SETMAR抗体 | 人5羟色胺(5-HT)PCR检测试剂盒免费代测 |
神经调节蛋白4抗体 | 小鼠脂联素(Acrp30)PCR检测试剂盒 |
SCARB1/Scavenger Receptor BI 高密度脂蛋白受体/清道夫受体重组兔单克隆抗体 | 大鼠补体因子B(CFB)PCR检测试剂盒 |
磷酸化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体 | 山羊黄嘌呤氧化酶(XOD)PCR检测试剂盒 |
小鼠绒毛膜促性腺激素(CG)PCR检测试剂盒 | 柯萨奇病毒 A5 型核酸检测试剂盒酵母膜蛋白提取试剂盒100T |
大鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)PCR检测试剂盒 | 小鼠磺基转移酶(PST)PCR检测试剂盒 |
人γ-谷氨酰环化转移酶(GGCT)核酸检测试剂盒 | 猪凋亡相关因子(FAS/CD95)PCR检测试剂盒 |
操作步骤:

整个流程遵循“样本处理 → 试剂配制 → 加样 → 上机检测 → 结果分析”的逻辑,核心是防污染和精准操作。
1. 样本处理 (核酸提取)
样本:鼻咽拭子、咽拭子或痰液样本。
裂解:将拭子浸入裂解液,充分混匀后室温静置10分钟。
提取:采用磁珠法或离心柱法提取总RNA,严格按照试剂盒说明书操作。
保存:洗脱后的RNA应立即使用或分装保存于-80℃。
2. 试剂配制与加样
反应体系准备:在试剂准备区配制Master Mix。根据待检测样本数计算总体积,通常按样本数 + 1管阴性对照 + 1管阳性对照的原则来配制。
推荐体系:例如,使用20μL体系的试剂盒,可包含qPCR预混液16μL、引物探针混合液4μL(具体体积请以实际说明书为准)。
分装:将配好的反应体系分装至PCR反应管中(如20μL/管)。
加样:在样本处理区,分别向反应管中加入5μL的模板RNA(样本、阳性质控、阴性质控)。盖紧管盖,短暂离心,避免污染和气泡。
3. 上机检测
运行程序:将反应管放入荧光定量PCR仪,运行预设程序。典型程序包括:
逆转录:50℃,15分钟(将RNA逆转录为cDNA)。
预变性:95℃,10分钟(激活Hot-Start Taq酶)。
扩增循环:通常为40个循环,每个循环包括变性(95℃,15秒) 和 退火/延伸(60℃,45秒),仪器在退火/延伸步骤同时采集荧光信号。
信号监测:仪器实时监测荧光信号变化,生成扩增曲线。
4. 结果分析与判定
Ct值:仪器根据荧光曲线自动计算阈值循环数(Ct值)。
结果判定:
阳性:样本Ct值 ≤ 37(具体阈值请以试剂盒说明书为准),且扩增曲线呈典型"S"型。
阴性:样本无Ct值或Ct值 > 40。
无效:阳性对照无Ct值或Ct值 > 35,或阴性对照有Ct值,需重新检测。
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