流行性乙型脑炎病毒核酸检测试剂盒 新品

 产品介绍：

流行性乙型脑炎病毒（Japanese Encephalitis Virus, JEV）核酸检测试剂盒是一种用于体外定性检测乙型脑炎病毒核酸的分子诊断工具。乙型脑炎是由乙脑病毒引起的一种急性中枢神经系统传染病，属于人畜共患的自然疫源性疾病，因此该试剂盒在临床早期诊断、流行病学调查及疾病防控中具有重要意义。

检测原理与技术

目前市面上的试剂盒主要基于 实时荧光定量 RT-PCR 技术（qRT-PCR），通常采用 TaqMan 探针法。

技术原理： 乙脑病毒是单股正链 RNA 病毒。试剂盒针对病毒基因组中高度保守的区域（如 3'UTR 非翻译区或 E 基因）设计特异性的引物和探针。

反应机制： 在 PCR 扩增过程中，随着目标序列的指数级扩增，荧光探针被酶切，释放出荧光信号（通常标记为 FAM 荧光素），仪器实时监测信号变化，从而实现高特异性和高灵敏度的检测。

一步法 vs 两步法： 市面上多为一步法 RT-PCR 试剂盒，即逆转录和 PCR 扩增在同一反应管中进行，操作简便，污染风险低，且能最大限度保留样本信息。

�� 核心性能指标

不同品牌的产品参数略有差异，但通常具备以下性能：

指标  典型参数  说明

检测样本  脑脊液、血清、蚊虫、组织悬液  适用于临床及媒介监测样本

检测时间  约 1.5 小时  含反转录和扩增步骤，远快于病毒分离培养

灵敏度  高  最低检测限可达 10² copies/mL 或 1 TCID₅₀

特异性  高  与登革病毒、黄病毒属其他成员无交叉反应

�� 典型操作流程

样本采集与处理： 采集患者脑脊液、血清或蚊虫研磨液等样本。

核酸提取： 使用试剂盒配套的病毒 RNA 提取试剂（通常为磁珠法或离心柱法）提取样本中的总 RNA。

反应体系配制： 将提取的 RNA 模板加入预混好的 RT-PCR 反应液（含酶、引物、探针等）中。

上机扩增： 放入荧光定量 PCR 仪（如 ABI 7500、Roche LightCycler 等）中运行程序。

结果判读： 根据扩增曲线和 Ct 值判定结果。

阳性： 出现典型的 S 型扩增曲线，且 Ct 值 ≤ 35-38（具体视说明书而定）。

阴性： 无扩增曲线，或 Ct 值 > 40。

�� 市场与应用现状

临床意义： 乙脑发病急、进展快，早期诊断至关重要。核酸检测可在发病早期（3-4天内）检测出病毒核酸，为临床救治赢得时间。

多重检测： 部分试剂盒可同时检测乙脑病毒和其他脑炎病原体（如登革热、森林脑炎病毒），用于鉴别诊断。

⚠️ 注意事项

窗口期限制： 乙脑病毒血症期短，发病 5-7 天后血液中病毒载量下降，此时核酸检测可能转阴。若临床高度疑似但检测阴性，建议结合 IgM 抗体检测 进行综合判断。

用途限制： 购买和使用时需确认产品注册证信息，部分产品仅用于科研或卫生监督，不得用于临床诊断。

防污染： RNA 极易降解且 PCR 灵敏度高，操作必须严格分区，防止气溶胶污染导致假阳性。

公司正在出售的产品：

注意事项：

1‌、严防污染‌

‌分区操作‌：必须在独立的生物安全柜内进行样本处理、试剂配制和加样，避免气溶胶交叉污染。

‌专用耗材‌：使用无核酸酶的枪头、EP管等，建议使用带滤芯枪头。

‌规范操作‌：加样后立即盖紧管盖，避免试剂外溅。

‌2、保证质量‌

‌样本处理‌：样本采集后应立即冷藏（2-8℃），长期保存需置于-70℃以下，避免反复冻融。

‌试剂保存‌：严格按照说明书要求的温度（通常是-20℃或2-8℃）保存试剂，避免反复冻融。

‌对照设置‌：每次实验必须设置阳性对照、阴性对照和空白对照，监控实验有效性。

3‌、注意安全‌

‌生物安全‌：阳性样本需按生物安全三级标准处理，实验人员需佩戴个人防护装备（PPE）。

‌废弃物处理‌：所有废弃物（包括耗材、样本）需经121℃高压灭菌30分钟后方可丢弃