产品介绍：
汉城病毒（Seoul Virus, SEOV）属于汉坦病毒属（Hantavirus），是引起肾综合征出血热（HFRS，俗称流行性出血热）的主要病原体之一。汉城病毒核酸检测试剂盒主要用于体外定性检测临床样本（如血清）中汉城病毒的RNA。
产品名称 | 汉城病毒核酸检测试剂盒 | 货号 | AP3209 |
产品分类 | 荧光PCR | 规格 | 50T |
1. 检测原理
目前的试剂盒主要基于实时荧光定量RT-PCR技术（Real-time RT-PCR）。
靶标基因： 针对汉城病毒基因组的保守区域设计引物和探针，通常位于S基因（编码核衣壳蛋白）或L基因（编码RNA聚合酶）。
技术原理： 采用一步法RT-PCR结合TaqMan探针法。
逆转录： 将样本中的病毒RNA反转录为cDNA。
扩增与检测： 利用特异性引物和荧光标记的探针进行PCR扩增。若样本中存在汉城病毒核酸，探针会被酶切并释放荧光信号，仪器通过监测荧光信号的循环阈值（Ct值）来判断结果。
双重/多重检测： 许多试剂盒设计为汉滩病毒/汉城病毒双重检测试剂盒，利用不同的荧光标记（如FAM和VIC通道）在同一反应管中同时区分检测汉滩病毒（HTNV，I型）和汉城病毒（SEOV，II型）。
2. 产品特点
高特异性： 能够特异性识别汉城病毒，通常不会与汉滩病毒、登革病毒、流感病毒等其他病原体发生交叉反应。
高灵敏度： 最低检测限通常可达 500 copies/mL，部分产品灵敏度更高，有助于在感染早期（病毒血症期）进行诊断。
快速高效： 检测时间通常在 1.5 - 2 小时 左右，远快于传统的病毒分离培养法。
防污染系统： 部分试剂盒含有UDG/dUTP防污染系统，能有效防止扩增产物的残留污染，降低假阳性风险。
3. 主要用途
临床辅助诊断： 用于检测疑似肾综合征出血热患者（特别是临床表现为发热、出血、肾损害的患者）血清或血浆中的汉城病毒核酸，辅助进行早期诊断和分型。
流行病学调查： 用于监测汉城病毒的流行情况，特别是在家鼠型疫区。
宿主监测： 用于检测鼠类等宿主动物中的病毒携带情况。
4. 储存与使用注意事项
储存条件： 试剂盒通常需要 -20℃ 避光保存（部分酶制剂对温度敏感），避免反复冻融，有效期通常为12个月。
样本类型： 主要用于检测急性期血清样本。发病早期（前3-5天）检出率最高。
操作规范： 需在具备PCR检测资质的实验室进行，严格分区操作，防止气溶胶污染。
结果判读：
阳性： 对应通道（如VIC或FAM）出现典型扩增曲线，且Ct值小于设定阈值（如Ct≤38）。
阴性： 无扩增曲线，或Ct值大于阈值。
无效： 阳性对照未扩增或内标未扩增，提示实验失败，需重做。
公司正在出售的产品：
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操作步骤：
整个流程遵循“样本处理 → 试剂配制 → 加样 → 上机检测 → 结果分析”的逻辑，核心是防污染和精准操作。
1. 样本处理 (核酸提取)
样本：鼻咽拭子、咽拭子或痰液样本。
裂解：将拭子浸入裂解液，充分混匀后室温静置10分钟。
提取：采用磁珠法或离心柱法提取总RNA，严格按照试剂盒说明书操作。
保存：洗脱后的RNA应立即使用或分装保存于-80℃。
2. 试剂配制与加样
反应体系准备：在试剂准备区配制Master Mix。根据待检测样本数计算总体积，通常按样本数 + 1管阴性对照 + 1管阳性对照的原则来配制。
推荐体系：例如，使用20μL体系的试剂盒，可包含qPCR预混液16μL、引物探针混合液4μL（具体体积请以实际说明书为准）。
分装：将配好的反应体系分装至PCR反应管中（如20μL/管）。
加样：在样本处理区，分别向反应管中加入5μL的模板RNA（样本、阳性质控、阴性质控）。盖紧管盖，短暂离心，避免污染和气泡。
3. 上机检测
运行程序：将反应管放入荧光定量PCR仪，运行预设程序。典型程序包括：
逆转录：50℃，15分钟（将RNA逆转录为cDNA）。
预变性：95℃，10分钟（激活Hot-Start Taq酶）。
扩增循环：通常为40个循环，每个循环包括变性（95℃，15秒） 和 退火/延伸（60℃，45秒），仪器在退火/延伸步骤同时采集荧光信号。
信号监测：仪器实时监测荧光信号变化，生成扩增曲线。
4. 结果分析与判定
Ct值：仪器根据荧光曲线自动计算阈值循环数（Ct值）。
结果判定：
阳性：样本Ct值 ≤ 37（具体阈值请以试剂盒说明书为准），且扩增曲线呈典型"S"型。
阴性：样本无Ct值或Ct值 > 40。
无效：阳性对照无Ct值或Ct值 > 35，或阴性对照有Ct值，需重新检测。
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