大鼠巩膜成纤维细胞
细胞简介 ：
大鼠巩膜成纤维分离自巩膜组织，巩膜是眼球壁的主要组成之一。是眼球纤维膜的后5/6部分。前方联接角膜，后方与视神经的鞘膜延续。巩膜在视神经穿出部附近厚，愈前愈薄，在肌腱附着处又复增厚。其与角膜交界处，外面有环形的角膜沟，深部有巩膜静脉窦。小儿的巩膜为浅蓝色，成年为白色，老年因脂肪沉着而带黄色。巩膜结构坚韧，有支持和保护眼内组织的作用。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 英文名称 | Rat Scleral Fibroblast Cells |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
货号 | XG-X4952 | 组织来源 | 巩膜组织 |
产品信息：
产品名称 大鼠巩膜成纤维细胞
英文名称 Rat Scleral Fibroblast Cells
组织来源 巩膜组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息：
包被条件 贴壁不包被
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠巩膜成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
方法简介 公司实验室分离的大鼠巩膜成纤维采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠巩膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养操作方法：
核心特点
高度生理相关性：保留了体内来源组织的结构、功能和基因表达特征。
有限寿命：与无限增殖的肿瘤细胞系不同，原代细胞增殖能力有限，经过一定次数的分裂后会进入衰老期，这更符合正常细胞的生理状态。
异质性：初始培养物通常是多种细胞类型的混合物，有时需要通过差速贴壁等方法进行纯化。
操作要求高：对培养环境、试剂质量和无菌操作的要求极为严格，培养难度大于永生化细胞系。
组织块培养法
取材与剪切
在无菌条件下取出组织，用Hanks液或PBS清洗，去除血污和脂肪、结缔组织等非目标成分。
用眼科剪将组织剪切成 0.5-1 mm3 的小块。
接种
用吸管将组织块均匀地贴附在培养皿或培养瓶的内表面，各组织块之间保持一定间距（约0.5 cm）。
吸去多余液体，将培养器皿翻转，放入 37℃、5% CO的培养箱中，静置 1-3小时，让组织块牢固贴壁。
加液培养
待组织块贴壁后，轻轻翻转培养瓶，从一侧缓慢加入足量的培养液，使组织块浸没在液体中，注意不要让液体直接冲击组织块，以免冲起。
继续在培养箱中静置培养。通常 3-5天 后可观察到细胞从组织块边缘长出。
公司正在出售的产品：
小鼠角膜成纤维细胞 Mouse Corneal Fibroblast Cells | AF750标记的微管蛋白抗体 |
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转移生长因子α抗体 | 山荷叶素22055-22-7 |
同源盒蛋白SIX4抗体 | N-苄基-十五烷酰胺1572037-13-8 |
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真菌细胞胞浆可溶性总蛋白制备试剂盒 | NCI-H1648细胞 |
关键操作技巧与注意事项：
成功的原代培养依赖于严谨的细节控制：
严格无菌操作：这是实验成功的基石。所有操作需在生物安全柜中进行，试剂和耗材必须无菌。
保持静置：细胞接种后的最初24-48小时内，应保持培养瓶绝对静置，避免频繁取出观察或晃动，这有助于细胞贴壁和伸展。
优化消化过程：
消化时间要恰到好处，过长会损伤细胞，过短则细胞分散不佳。
胶原酶对组织的损伤较小，常用于分离活性要求高的细胞；胰蛋白酶作用较强，需严格控制时间。
酶液应新鲜配制，避免活性下降。
控制接种密度：原代细胞在低密度下不易存活，建议适当提高初始接种密度，以保证细胞间的相互作用促进其生长。
定期换液：根据培养基颜色变化（如变黄）或每隔2-3天更换一次培养液，以清除代谢废物并补充营养。
关键字： 大鼠巩膜;成纤维细胞;
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