大鼠胚胎成纤维细胞
细胞简介 ：
大鼠胚胎成纤维分离自胚胎；成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞，能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子，故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性，且分泌效果优于外源添加的一些因子，而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境，故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 英文名称 | Rat Embryonic Fibroblast Cells |
生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
货号 | XG-X4961 | 组织来源 | 胚胎组织 |
产品信息：
产品名称 大鼠胚胎成纤维细胞
英文名称 Rat Embryonic Fibroblast Cells
组织来源 胚胎组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠胚胎成纤维细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
方法简介 公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养操作方法：
核心特点
高度生理相关性：保留了体内来源组织的结构、功能和基因表达特征。
有限寿命：与无限增殖的肿瘤细胞系不同，原代细胞增殖能力有限，经过一定次数的分裂后会进入衰老期，这更符合正常细胞的生理状态。
异质性：初始培养物通常是多种细胞类型的混合物，有时需要通过差速贴壁等方法进行纯化。
操作要求高：对培养环境、试剂质量和无菌操作的要求极为严格，培养难度大于永生化细胞系。
组织块培养法
取材与剪切
在无菌条件下取出组织，用Hanks液或PBS清洗，去除血污和脂肪、结缔组织等非目标成分。
用眼科剪将组织剪切成 0.5-1 mm3 的小块。
接种
用吸管将组织块均匀地贴附在培养皿或培养瓶的内表面，各组织块之间保持一定间距（约0.5 cm）。
吸去多余液体，将培养器皿翻转，放入 37℃、5% CO的培养箱中，静置 1-3小时，让组织块牢固贴壁。
加液培养
待组织块贴壁后，轻轻翻转培养瓶，从一侧缓慢加入足量的培养液，使组织块浸没在液体中，注意不要让液体直接冲击组织块，以免冲起。
继续在培养箱中静置培养。通常 3-5天 后可观察到细胞从组织块边缘长出。
公司正在出售的产品：
兔脑膜成纤维细胞 Rabbit Meningeal Fibroblast Cells | 11号染色体开放阅读框67抗体 |
1321N1细胞 | 组织中链脂酰合成酶（ACYL COA SYNTHETASE） |
血液血管紧张素Ⅰ转化酶2（ACE2）活性荧光共振能量转移法（FRET）定量检测试剂盒 | 组织磷脂酶A2（Phospholipase A2）活性荧光定量检测试剂盒 |
钙钠交换体（NCX）蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | 石蜡切片组织DAP KINASE蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
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碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体 | DTX4蛋白抗体 |
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植物mRNA直接纯化试剂盒 | EOMA细胞 |
关键操作技巧与注意事项：
成功的原代培养依赖于严谨的细节控制：
严格无菌操作：这是实验成功的基石。所有操作需在生物安全柜中进行，试剂和耗材必须无菌。
保持静置：细胞接种后的最初24-48小时内，应保持培养瓶绝对静置，避免频繁取出观察或晃动，这有助于细胞贴壁和伸展。
优化消化过程：
消化时间要恰到好处，过长会损伤细胞，过短则细胞分散不佳。
胶原酶对组织的损伤较小，常用于分离活性要求高的细胞；胰蛋白酶作用较强，需严格控制时间。
酶液应新鲜配制，避免活性下降。
控制接种密度：原代细胞在低密度下不易存活，建议适当提高初始接种密度，以保证细胞间的相互作用促进其生长。
定期换液：根据培养基颜色变化（如变黄）或每隔2-3天更换一次培养液，以清除代谢废物并补充营养。
关键字： 大鼠胚胎;成纤维细胞;
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