达氏疏螺旋体(达氏包柔螺旋体)染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 达氏疏螺旋体(达氏包柔螺旋体)染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Borrelia duttonii Dye-based qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR4540 |
产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术,专用于检测达氏疏螺旋体(Borrelia duttonii)DNA,具有高灵敏度、高特异性及操作简便等特点。适用于科研领域的定性或定量分析,检测线性范围覆盖5个数量级(10^1–10^5拷贝/μL)。
试剂盒组成
| 成分 | 规格/包装 | 保存条件 |
| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL(预混酶与dNTP) | -20℃避光 |
| 引物混合液 | 100 μL(特异性引物) | -20℃避光 |
| 阳性对照(1×10^8拷贝/μL) | 50 μL | -20℃避光 |
| 超纯水 | 1 mL | 室温 |
| 使用说明书 | 1份 | 随盒保存 |
注:试剂开封后需避免反复冻融,短期使用可置于4℃保存(≤1周)。
自备材料
样品DNA模板(推荐浓度≥10 ng/μL)。
核酸纯化试剂盒(如需提取样本DNA)。
离心管(0.2 mL PCR管、15 mL锥形管)、移液器及无菌吸头。
荧光定量PCR仪(兼容SYBR Green通道)。
操作步骤
样本准备:按规范提取样本DNA,建议使用超纯水稀释至适当浓度。
反应体系配制(20 μL/反应):
PCR MagicMix 3.0:10 μL
引物混合液:2 μL
模板DNA:2 μL
超纯水:补至20 μL
PCR程序设置:
预变性:95℃ 5 min
循环阶段(40 cycles):95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec(采集荧光信号)
数据分析:通过标准曲线法或Ct值比较进行定量/定性分析。
性能参数
灵敏度:最低检测限100拷贝/反应。
特异性:引物针对达氏疏螺旋体保守序列设计,不与相近物种(如伯氏疏螺旋体)交叉反应。
重复性:批内/批间变异系数(CV)≤5%。
注意事项
实验分区操作(样本处理、试剂配制、扩增区分离),避免污染。
反应液需避光保存,避免气泡干扰。
废弃物需按生物安全规范处理(如10%次氯酸消毒)。
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