检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对猪链球菌（Streptococcus suis）基因组高度保守区域设计特异性引物，通过荧光信号实时监测核酸扩增过程，实现定性及定量检测。反应体系中若存在猪链球菌核酸模板，PCR扩增将释放荧光信号，经仪器分析后可确定目标病原体含量。
产品名称 | 猪链球菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Streptococcus suis Universal Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4385 |
产品特点
高灵敏度：优化引物设计，检测限低至10拷贝/μL。
特异性强：引物经严格验证，避免与其他病原体核酸交叉反应。
即开即用：预混反应液含PCR所需酶、dNTPs及缓冲体系，仅需添加模板DNA。
双重质控：提供阳性对照（非活体DNA片段）和阴性对照（无模板对照，NTC），确保实验可靠性。
宽线性范围：定量检测覆盖5个数量级（10²–10⁷拷贝/μL）。
操作步骤
样本处理
临床样本（血液、组织、分泌物等）：
血液：采集2 mL静脉血至EDTA抗凝管，混匀后提取DNA。
组织/分泌物：无菌采集后置于转运培养基，匀浆离心取上清提取核酸。
环境样本：按标准预处理流程富集微生物后提取DNA。
试剂准备
解冻预混液：-20℃取出后冰上缓慢溶解，轻弹混匀，避免气泡。
阳性对照稀释：按10倍梯度稀释至10²–10⁷拷贝/μL（需独立操作区）。
反应体系配置（20 μL/孔）
| 组分 | 体积（μL） |
| 2× SYBR Green预混液 | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| 模板DNA | 2 |
| RNase-free水 | 6 |
PCR程序设置
预变性：95℃ 3分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
熔解曲线分析：60–95℃，每0.5℃递增，持续5秒/步
结果判读
定性检测：Ct值≤35且熔解曲线为单一峰，判为阳性。
定量分析：根据标准曲线计算模板拷贝数。
注意事项
实验分区操作，避免气溶胶污染。
阴性对照需无扩增曲线，否则提示污染。
建议设置3次技术重复以确保数据可靠性。
储存及有效期
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
有效期：12个月。
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