产紫青霉染料法荧光定量PCR试剂盒

产紫青霉染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品特点

即开即用：用户仅需提供DNA模板，无需额外配制反应体系。

高特异性：引物针对产紫青霉保守序列设计，与其他微生物或植物无交叉反应。

灵敏度高：优化后的染料法检测限低，可检出微量目标DNA。

质量控制：提供阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），便于排除假阴性结果。

多功能性：支持定性与定量检测，定量线性范围覆盖5个数量级。

兼容性：适用于常规荧光定量PCR仪，与多数核酸提取试剂盒兼容。

试剂盒成分

| 成分编号 | 组分名称 | 规格/包装 |

| 1 | PCR MagicMix（含染料） | 1 mL（红盖） |

| 2 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |

| 3 | 产紫青霉PCR引物混合液 | 100 μL（白盖） |

| 4 | 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL）| 50 μL |

操作步骤

DNA提取

使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒制备样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。

标准曲线制备（定量检测需执行）

标记6支离心管（编号7至2），每管加入45 μL DEPC-H2O。

取5 μL阳性对照加入7号管，震荡混匀，得到1×10⁷拷贝/μL的标准品。

梯度稀释至2号管（1×10²拷贝/μL），冰上保存备用。

PCR反应体系配制

每20 μL反应体系建议如下：

PCR MagicMix：10 μL

引物混合液：2 μL

DNA模板：2 μL（阴性对照以水替代）

超纯水：补足至20 μL

荧光定量PCR程序

预变性：95℃ 5分钟；

循环扩增（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

溶解曲线分析（可选）：60℃至95℃，每0.5℃递增。

注意事项

仅限科研：不可用于临床诊断或生产用途。

分区操作：DNA提取、稀释及PCR配制需在不同区域进行，避免污染。

保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

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